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之杨若古兰创作(一)溶液配制留意事项1.药品要有较好的质量试剂分为优级纯(包管试剂,Guaranteedreagent,G.R.)、分析试剂(Antalyticalreagent,A.R.)化学纯(Chemicalpure,C.P.)和实验试剂(Laboratoryreagent,L.R.)等等.工业用的化学试剂,杂质较多,只在个别情况下利用,如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等.2.药品称量要精确.3.配制试剂用水利用新颖的去离子水或双蒸馏水,比电阻值在50万欧姆以上,pH在5.5~7.0之间才可利用,在组织培养等特殊用处时应留意此项请求,配制普通化验用溶液只请求用双蒸馏水或去离子水.4.配好后的溶液,应立即除菌处理(如高压灭菌、抽滤或加抑菌物资),以防杂菌生长.(二)0.067(1/15)Mol/L磷酸缓冲液1.1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制:称取磷酸二氢钾(KH2PO4,A.R.),用蒸馏水溶解后,倾入1000ml容量瓶内,再浓缩至刻度(1000ml).2.1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制:称取无水磷酸氢二钠(Na2HPO4,A.R.)(或者Na2HPO4·2H2O/L.(四)0.2Mol/LPB缓冲液附表30.2mol/LPB缓冲液配制法pH0.2Mol/LNa2HPO4(ml)0.2Mol/LNaH2PO4(ml)5.88.092.06.012.387.76.218.581.56.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.07.891.58.58.094.75.30.2Mol/LNa2HPO4·2H2O溶液/LNa2HPO4·12H2O溶液含/L0.2Mol/LNaH2PO4·H2O溶液含/LNaH2PO4·2H2O溶液含/L欲配0.1Mol/LPB缓冲液则在0.2Mol/LPB缓冲液的基础上加H2O浓缩1倍即可.欲配制PBS液时,则在溶液中加0.85%的NaCl溶液即可.(五)无钙镁离子磷酸缓冲盐水(PBS)(0.15Mol/LPH7.2)NaClKClNa2HPO4(如为Na2HPO4·12H2O,则为)KH2PO4将上述试剂顺次溶于1000ml去离子水中,完整溶解后,115℃高压灭菌10min~15min,存在4℃冰箱中备用.此液可用于配制和浓缩细胞分散剂和洗濯细胞培养物.(六)硼酸盐缓冲液(Boratesalinebuffer)文章来自:医药园(http://www.biodrug.cn)清算:zfg1.硼酸(H3BO3)0.2Mol/L硼酸:硼酸加水至1000ml.2.硼砂(Na2B4O7)0.05Mol/L硼砂:硼砂加水至1000ml.附表4分歧pH的0.2Mol/L硼酸缓冲液配制法pH0.05Mol/L硼砂(ml)0.2Mol/L硼酸(ml)pH0.05Mol/L硼砂(ml)0.2Mol/L硼酸(ml)7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.03.07.09.08.02.0(七)巴比妥缓冲液1.pH8.2离子强度0.05Mol/L巴比妥缓冲液巴比妥钠蒸馏水3000ml1.17NHCl55.0ml(1.17NHCl=193ml浓HCl加1807ml蒸馏水)⑴将巴比妥钠溶于3000ml蒸馏水.⑵加1.17NHCl55ml.⑶用HCl调节pH到8.2,并加蒸馏水至4265ml.2.pH8.40.06Mol/L巴比妥缓冲液巴比妥巴比妥钠加蒸馏水至1000.00ml3.pH8.60.06Mol/L巴比妥缓冲液巴比妥巴比妥钠加蒸馏水1000.00ml(八)0.2Mol/L醋酸盐缓冲液见表附表5附表50.2Mol/L醋酸盐缓冲液配制法pH0.2Mol/LTris(ml)0.1Mol/LHCl(ml)pH0.2Mol/LTris(ml)0.1Mol/LHCl(ml)23℃37℃23℃37℃9.108.952558.067.902527.58.928.76257.57.967.822530.08.758.602510.57.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.57.667.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.328.182520.07.367.222542.5(九)三羟甲基甲烷—盐酸缓冲液(Tris—HCl缓冲液)分歧pH,0.05Mol/L25ml0.2Mol/L三羟甲基氨基甲烷加хml0.1NHCl,加水浓缩至100ml(见下表)附表6Tris—HCl缓冲液配制法pH0.2Mol/LTris(ml)0.1NHCl(ml)