果蝇性状、生活史观察及饲养.ppt

实验十二、果蝇的性状、生活史观察及饲养（3学时）一、实验目的1.了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点；2.区别雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性状特征；3.掌握实验果蝇的饲养、管理及实验处理方法和技术。二、实验材料、用具及试剂果蝇：野生型，白眼黑身，白眼小翅，红眼残翅，黑檀体。双目解剖镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、白瓷板、新毛笔、乙醚、酒精三、实验内容1.果蝇的生活史果蝇（Drosophilamelanogaster2n=8）中文名：黑腹果蝇果蝇属于节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇科、果蝇属，与家蝇是不同的种。果蝇的优点：1、生活史短，20-25℃条件下完成一个世代需12-15天。2、繁殖率高，一对果蝇可产卵400-500只。3、饲养方便。4、突变率高。5、形态容易辨认。果蝇的生活周期长短与温度关系很密切。30℃以上的温度能使果蝇不育和死亡，低温则使它的生活周期延长，同时生活力也降低，果蝇培养的最适温度为20-25℃。生活史：完全变态：最适温度：20-25℃生活史周期：12-15day(20-25℃)10day(26℃)57day(10℃)羽化后：8-12h交配两天后产卵成虫存活：15day(25℃)卵：羽化后的雌蝇一般在12小时后开始交配，两天后才能产卵。卵长0.5mm，为椭圆形，腹面稍扁平，被绒毛膜，在背面的前端伸出一对触丝（filament），它能使卵附着在食物(或瓶壁)上，不致深陷到食物中去。三龄幼虫4.5mm，在培养基上作沟穿孔。蛹：幼虫生活7-8天准备化蛹，化蛹前从培养基上爬出，附着在瓶壁上，逐渐形成一梭形的蛹。在蛹前部有两个呼吸孔，后部有尾芽，起初蛹壳颜色淡黄而柔软，以后逐渐硬化，变为深褐色，表明即将羽化了。成虫：幼虫在蛹壳内完成成虫体型和器官的分化，最后从蛹壳前端爬出。刚从蛹壳里羽化出来的果蝇虫体比较长，翅膀尚未展开，体表尚未完全几丁质化，故呈半透明的乳白色。透过腹部体壁，可以看到黑色的消化系统。不久，变为短粗圆形，双翅展开，体色加深。如野生型初为浅灰色，然后呈灰褐色。果蝇的寄生虫——螨虫2.形态构造头部：有一对复眼，三个单眼和一对触角。胸部：有三对足，一对翅和一对平衡棒。腹部：背面有黑色环纹，腹面有腹片，外生殖器在腹部末端，全身有许多体毛和刚毛。3.成虫雌雄的鉴别4.果蝇常见的几种突变类型5.果蝇的性别决定1）染色体组成果蝇为二倍体2n=8,核内有丝分裂：不涉及细胞分裂和核分裂的染色体分裂方式。体联会：一些特殊的体细胞中（如果蝇唾腺细胞）的染色体经多次复制却不分开，依旧紧密地排列在一起就象减数分裂中的联会现象一样。染色体组：来自二倍体生物的正常配子的所有染色体。连锁群：来自配子中的每条染色体及其携带的基因。2）果蝇的性别决定果蝇的性别决定为XY型，Y染色体在性别决定上不起作用，只与育性有关。含有Y染色体，可产生正常的配子，不含Y染色体，则配子不育。性别决定与性比值（性指数）有关。X/A=1则为雌性；X/A=0.5则为雄性。X/A＞1，为超雌；X/A＜0.5，则为超雄；0.5＜X/A＜1则为中间性。雌雄基因平衡理论：果蝇X染色体上有很多雌性基因，常染色体上有很多雄性基因，Y染色体上很少或没有与性别决定有关的基因，因此性别决定于基因的平衡。3）果蝇的连锁群X染色体上有141个基因；第2染色体上有228个基因；第3染色体上有156个基因；第4染色体上有12个基因。4)同源染色体：来源相同、结构相似、控制的性状相同，在减数分裂中配对的一对染色体。四、实验步骤1.果蝇的饲养1）培养基的配制果蝇以酵母菌为食，常采用发酵的培养基繁殖酵母菌来饲养果蝇。培养基常用玉米粉、米粉或香蕉配制，本实验采用玉米培养基，其配方如下：果蝇培养基成份（100ml）配制方法注：分装前将饲养瓶、棉塞、吸水纸及其它用具和器皿高压蒸气灭菌（15磅，15min）。分装时若瓶口较小，用大漏斗将饲料倒入，勿使饲料粘附瓶壁。若无干酵母粉，可于饲料分装后滴几滴酵母液于饲料表面。待饲料冷却后，用酒精棉球或吸水纸将瓶壁上的水汽擦净，塞上棉塞。培养瓶的灭菌配制好的培养基2）果蝇继代培养幼虫化蛹时爬到瓶璧或滤纸上。2果蝇性状的观察1）果蝇的麻醉处理在果蝇的性状观察、性别鉴定以及杂交亲本接种等操作中，应先将果蝇麻醉，使其保持安静状态。麻醉方法如下：（1）准备一只与培养瓶口径相同的空瓶作为麻醉瓶，并配以脱脂棉塞。（2）去掉培养瓶棉塞，立即与麻醉瓶口相对，培养瓶在上，一手稳住两瓶，另一手轻轻震拍培养瓶，使果蝇落入麻醉瓶中。（3）滴数滴乙醚于麻醉瓶棉塞内，迅速将两瓶塞住，约30s，麻醉瓶内的果蝇即处于麻醉状态。注意不能麻醉过度。若蝇翅与蝇体呈45º角翘起，表明麻醉过度，不能复苏而死亡。（4）将麻醉后的果蝇放在白瓷板或白纸板上，用毛笔刷移动检查，根据需要用肉眼、放大镜或解剖镜