麻黄内生真菌及棘豆蠕孢菌的抑菌活性研究.doc

分类号：单位代码：10193密级：学号：硕士学位论文麻黄内生真菌及棘豆蠕孢菌的抑菌活性研究StudyonantifungalantifungalandinsecticidalactivitiesofUndifilumoxytropisandtheendophytesfromEphydra学位类别：医学硕士专业名称：研究方向：指导教师：所在学院：年月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢所列内容外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日指导教师签名：签字日期：年月日PAGE\*MERGEFORMATIV摘要植物内生真菌是指存在于植物体内且不引起植物本身任何明显病害症状的一类真菌，其生活史中的某一阶段或全部生活史发生于植物组织内，具有丰富的物种多样性，能够产生与宿主植物相似或相同的活性代谢产物。因此，植物内生真菌具有作为新型药物的开发资源而备受学者关注。本文选取采自日本的3种麻黄属植物进行植物内生真菌的分离，以及甘肃棘豆中的一种棘豆孺胞菌作为研究材料，对两种植物的内生真菌通过液体深层发酵培养获得发酵产物，并对其活性成分及抑菌杀虫作用进行初步研究。为得到与宿主植物相同或相似的活性成分，本实验对采自日本的3种麻黄属植物茎组织进行内生真菌的分离。共分离出37株内生真菌，其中草麻黄Ephedrasinica分离15株，双穗麻黄Ephedradistachya分离16株，蓝麻黄Ephedraglauca分离6株。PDA培养基中分离出23株，占总数的62%，CMA培养基中分离出14株，占总数的38%。通过观察分离得到的内生真菌的菌落形态将其分为以下几种优势种群：芒果球座菌属（Guignardiasp.），拟盘多毛孢属（Pestalotiopsissp.），枝孢属（Cladosporiumsp.），炭角菌属（Xylarialessp.），毛壳菌属（Chaetomiumsp.），小丛壳菌属（Glomerellasp.）。对37株植物内生真菌进行液体发酵培养，获得干燥菌丝体粉末各10g，加入95%的乙醇进行回流提取，提取液中加入少量2%的HCL溶解过滤，分出酸液进行生物碱项测试，结果，优势种群芒果球座菌属（Guignardiasp.）检测出有生物碱成分。对芒果球座菌属（Guignardiasp.）内生真菌菌株ES-C4进行大量的发酵培养，得干燥菌丝体200g，发酵液浸膏450g。本文对菌株ES-C4的发酵产物甲醇提取物各极性进行了抑菌活性部位的筛选，以菌丝体和发酵液为原料，甲醇提取物石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇各萃取部分作为供试品，采用滤纸片法，以黑曲霉（Aspergillusniger）、黄曲霉（HYPERLINK"javascript:void(0)"AspergillusHYPERLINK"javascript:void(0)"flavus）、烟曲霉（HYPERLINK"javascript:void(0)"