红曲霉的代谢产物研究毕业论文.doc

北京工商大学毕业论文（设计）编号：毕业论文(设计)题目：院（系）食品学院专业食品科学与工程学生姓名成绩指导教师（职称）讲师年月诚信声明本人郑重声明：所呈交的毕业设计(论文)是我个人在导师指导下,由我本人独立完成。有关观点、方法、数据和文献等的引用已在文中指出,并与参考文献相对应。据我查证，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表和撰写的研究成果，也不包含为获得其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。我承诺，论文中的所有内容均真实、可信。如在文中涉及到抄袭或剽窃行为，本人愿承担由此而造成的一切后果及责任。毕业论文(设计)作者签名：签名日期：年月摘要红曲的药用价值和保健功效日益引人关注，其中洛伐他汀作为红曲主要的调脂因子成为科研热点和红曲产业发展的重点。聚酮化合物MonacolinK是其中一种高效的降胆固醇药物，由红曲菌和土曲霉次级代谢产生，本实验研究红曲霉的代谢产物MonacolinK，通过对红曲霉次级代谢产物的测定，我们确定它产生MonacolinK最多的生长期，然后我们对其菌液进行RNA提取，通过对RNA的逆转录，我们得到cDNA，进行PCR扩增，验证Mokf和Mokh两段目的基因的存在，以及它们对红曲霉代谢产生MonacolinK的重要作用。对红曲菌功能基因组的深入研究，以及相应遗传转化体系的建立与完善，我们还需更加努力。关键字：红曲MonacolinKPCRRNA提取红曲霉AbstractThemedicinalvalueandhealthcarefunctionofredriceisbecomingmoreandmoreattractivetopeople,Lovastatinasredricemainlipidfactorbecomeresearchhotspotandfocusofredriceindustrydevelopment.MonacolinK,oneofpotentcholesterol-loweringpolyketidecompounds,couldbeproducedbyMonascussppandAspergillusterreus.weexperimentonMonacolinKwhichisoneofmonascusmetabolites.Accordingtothedeterminationofmonascussecondarymetabolites，WedeterminedthegrowingperiodwhenitproduceMonacolinKfastest.ThenweextractRNAonitsmicrobial.BasedonthereversetranscriptionofRNA,weobtaincDNA,thenweamplifycDNAusingPCR.WevalidatetheexistenceoftwoaimgenesMokfandMokhandtheirimportancetomonascusproducingMonacolinK.WiththefurtherstudyonMonascusfunctionalgenomics,aswellastheestablishmentandimprovementofthecorrespondinggenetictransformationsystem,wehavetoworkharder.Keywords：MonacolinKredricePCRextractRNAmonascus第一章绪论71.1红曲和红曲霉71.1.1红曲和红曲霉的概述71.1.2红曲和红曲霉的发展前景71.2红曲霉的生物学特征101.2.1红曲霉的分类101.2.2红曲霉的形态学特征101.3红曲霉的代谢产物111.3.1莫纳克林K111.3.2红曲红素131.3.3桔霉素141.4红曲霉的培养141.4.1固态发酵141.4.2液态发酵151.5洛伐他汀（Monacolink）151.5.1他汀化合物的简述151.5.2他汀类化合物的结构161.5.3红曲洛伐他汀161.6研究内容和意义17第二章实验材料与方法182.1实验材料182.1.1实验所用菌种182.1.2实验所用培养基182.1.3主要仪器和试剂药品182.2实验方法202.2.1菌种培养202.2.2菌落观察及菌落生长情况及代谢产物测定212.2.3DNA的提取及检测212.2.4RNA的提取222.2.5逆转录RNA成cDNA（建立20ul反应体系）242.2.6PCR扩增逆转录得到的cDNA25第三章实验结果与分析263.1实验结果263.1.1菌落形态观察263.1.2菌种生长曲线273.1.3莫纳克林K代谢情况273.1.4红曲霉DNAPcr扩增琼脂糖凝