HIV质控与评价PPT课件.ppt

艾滋病检测实验室的质量控制与评价一、质量控制采集标本前病人的准备正确的标本采集方法准确及时的运送标本实验前正确地处理和保存标本实验中质量控制实验后质量控制质控品外部对照质控血清的组成外部对照质控血清的来源每一次试验必须使用外部对照质控血清建立质控图，即检验性能数据与计算出的“控制线”进行比较的图上面标有一中心横线及其上、下各一或两条平行的质控线，并有按时间顺序填入的各质控血清测定的数值，以便监控实验操作的一致性和结果的准确性。同时可以了解各批试剂盒之间的误差（批间差异）。算术平均值（）：采用至少20次（天）所测得的外部对照质控血清S/CO值结果计算出平均值标准差（s）：是描述样本与均数之间离散程度的一个指标，是与对照质控血清S/CO值均值有关的预期范围。一组S/CO值标准差以s表示变异系数（cv）：是反映各次S/CO值相对均值的离散程度的一个指标，可以用于衡量被检标本检测的重复性或精密度。计算公式质控图的建立以每个质控对照的OD值/CUTOFF比值（S/CO）为纵座标（Y轴），每一次实验为横座标（X轴）建立质控图。①采用至少20次（天）所测的外部对照质控血清S/CO值结果计算出平均值（）；②计算20次S/CO值的标准差（s）；③计算出±1s，±2s，±3s范围；④标出每次实验外部对照值，每次实验质控的结果依次点入该质控图框架图中。质控图制作实例质控图质控图①外部对照S/CO值超出±2s，系统处于告警状态，应予注意，是否可以继续检测需要进一步观察；②失控：外部对照S/CO值超出±3s，系统处于失控状态，本次实验结果不能被接受，需查找原因，重新检测；③位移：如果几个连续质控对照值（3-5次）都落在均值的一侧称之为位移，通常表示存在大的变化（失控）。引起位移的原因有使用新批号的试剂盒、使用新试剂、实验员的更换、孵育温度的改变、仪器故障等。④趋势：当几个连续质控对照值（5-7个）几乎按一个方向分布时称之为趋势，通常由参数的缓慢改变引起，如试剂失效和移液器逐渐不准确等。发生位移和趋势的最常见的原因是试剂（如酶标记物）或对照的失效。北京市疾病预防控制中心①建立质控图的目的是发现出现的问题，所以在每次实验时应该观察外部对照值是否在允许范围之内；②为减少试剂盒更换造成的变化，最好长期稳定地使用一种质量好的试剂盒，更换不同厂家的试剂盒及改用新批号试剂盒应重新制作质控图；③每月定期召开质控分析会，讨论本月质控情况；④质控结果失控时，应填写报告单交质量负责人，分析原因并决定是否发出检测报告；⑤使用新批次的外部对照质控血清时，必须重新绘制质控图。变异系数小于20%，表示处于稳定状态。在<20%区间，表示对照值处于稳定状态，虽然对均值仍有一定的离散，但从标准差所规定的可信限而言，仍然是可靠的。在不同的试剂盒对照之间持续出现高值（cv>20%）时，提示加样量不一致。校准加样器及每次更换吸头加样可以减少cv值使对照值更趋一致。过去认为OD值在CUTOFF值±10%~15%范围内的样本定为灰色带反应。对这类标本最好复检，或用其他方法再检测，通过灰区的判断有助于发现早期感染者目前的EIA试剂已有较高的灵敏度，EIA检测应该只有两种结果：阳性或阴性即刻法质控4、将SI上限和SI下限与表中数字比较当SI上限和SI下限<n2s时表示处于控制范围内，可以继续测定当SI上限和SI下限有一值处于n2s~n3s之间时表示该值在2s~3s范围，处于“告警”状态当SI上限和SI下限有一值处于>n3s值时表示该值已在3s范围之外，属“失控”数值处于“告警”和“失控”状态应舍去，重新测定该质控血清和病人样品。舍去的只是失控的数值，其它值仍可继续使用必须使用经卫生部批准或注册，中国药品生物制品检定所批批检定合格、有效期内且保存条件符合要求的国产或进口HIV1+2混合型抗体初筛试剂盒按照SOP中规定的要求进行操作，对影响检验的物理因素，如孵育时间、反应温度、洗涤程序和次数等，均应按试剂盒说明书的要求操作，以保证质量控制实验前必须检查待检标本的质量，如标本不符合要求必须重新采集标本。冰冻的标本应全部融化，摇匀后检测每次检验，内部对照和外部对照的结果必须在允许的范围内，否则应视为无效二、质量评价必要性也称为能力验证（PT），是指多家实验室分析统一标本并由外部独立机构收集、反馈实验室上报结果并评价实验室检测能力的活动。主要用途：评价实验室的分析能力；监控实验室可能出现的技术问题；改正存在的问题；改进分析能力、实验方法和其它实验室的可比性；评价实验室工作人员的能力；教育和训练实验室工作人员；作为实验室质量保证的外部监督工具。PT报告中可以回答两个重要问题PT失败时应注意PT的不足室间质评与室内质控的关系⑴室间质评与室内质控的关系⑶室间质量评价体系室间质评方式质量评价管理谢谢!