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非发酵菌群的分类鉴定第一节非发酵菌概述非发酵菌的种类很多,包括十几个菌属、几十个种,有些还有生物型、亚型等。但与医学关系密切的、具有临床意义的有:假单胞菌属、寡氧单胞菌属、产碱杆菌属、黄杆菌属、鲍特氏菌属、金氏杆菌属、不动杆菌属、无色杆菌属、莫拉氏菌属、艾肯氏菌属、土壤杆菌属、军团菌属。但在临床上用一般方法不能够分离出来的细菌有:军团菌属营养要求苛刻,普通培养基、血平板和巧克力平板均不生长;生长过程中需要多种微量元素如:铁、钙、镁、锰、锌、钼等作为酶的协同因子;同时需要甲硫氨酸、半胱氨酸等特殊氨基酸才能生长。目前公认的最适宜培养基是缓冲活性炭酵母浸出液,加上铁、L-半胱氨酸和α-酮戊二酸组成的BCYEa(bufferedcharcoal–yeastextractagar)培养基。因此在临床上真正能分离出来且有临床意义的非发酵菌群有:第二节非发酵菌群的初步识别第三节、非发酵菌群的属间鉴别(一)、氧化酶阴性菌群的属间鉴别(二)、氧化酶阳性菌群的属间鉴别第四节、非发酵菌群的属内鉴别一、假单胞菌属和寡氧单胞菌属假单胞菌科由假单胞菌属及其亲缘关系密切的菌属(以前大部分属于假单胞菌属)组成。用于假单胞菌科分类的方案有两个:其一:根据细菌的表型特征分为七个主要的组,即:产荧光组、斯氏族、产碱组、食酸组、类鼻疽组、敏捷—德氏组、缺陷组。其二:根据rRNA—DNA同源性将假单胞菌科分为5个rRNA同源群,即:rRNA同源群Ⅰ—包括铜绿假单胞菌等12个种;rRNA同源群Ⅱ—包括伯克霍尔德菌属等7个种;rRNA同源群Ⅲ—包括食酸丛毛单胞菌等7个种;rRNA同源群Ⅳ—微小假单胞菌等8个种;rRNA同源群Ⅴ—寡氧单胞菌等64个种。此外,还有4个种属于rRNA同源群未知的假单胞菌。上述分类中,不管采用哪种分类,临床上常见的只有两个种,即假单胞菌属的铜绿假单胞菌和寡氧单胞菌属的嗜麦芽寡氧单胞菌。1、假单胞菌属铜绿假单胞菌鉴别要点:2、寡氧单胞菌属该菌的生长特性、营养要求、及其它生物学性状与铜绿假单胞菌极为相似,所不同的是氧化酶阴性,这是与假单胞菌属相区别的重要特性;此外,该菌一端具有3根以上丛鞭毛,运动活泼,可与氧化酶阴性的不动杆菌属和副百日咳鲍特氏菌相鉴别。3、鼻疽(类鼻疽)伯克霍尔德菌这两种细菌均对马、驴、骡、猫、狗等动物感染。人类感染是经伤口或粘膜、呼吸道而进入体内。急性患者可有高热、衰竭等全身症状;皮肤、皮下、鼻粘膜出现结节和溃疡;肺鼻疽病有胸痛、咳嗽、咳血等症状。细菌进入血流,可形成菌血症及内脏脓肿,最后常因脓毒血症而死亡。慢性患者全身症状不定,可有皮肤、皮下溃疡,其潜伏期可达数年。从患者的血液、尿液、痰液、脓液、创口分泌物中均可分离出上述两菌。二、产碱杆菌属分类及鉴定;产碱杆菌属目前分为3个种、两个亚种和一个型,即:粪产碱杆菌、皮乔特产碱杆菌、木糖氧化产碱杆菌。木糖氧化产碱杆菌去硝化(脱硝)亚种;木糖氧化产碱杆菌木糖氧化亚种。粪产碱杆菌Ⅱ型、三、黄杆菌属黄杆菌属目前共分为8个种和4个未命名的生物群。它们分别是:脑膜炎败血黄杆菌、芳香黄杆菌、短小黄杆菌、水田黄杆菌、嗜醇黄杆菌、嗜糖黄杆菌、嗜温黄杆菌、薮内黄杆菌及黄杆菌Ⅱb、Ⅱe、Ⅱh、Ⅱi群。其中脑膜炎败血黄杆菌、芳香黄杆菌、短小黄杆菌和黄杆菌Ⅱb群可引起人类疾病。(四)、鲍特氏菌属主要特性:1、该属细菌为GN无芽孢球杆菌。百日咳鲍特氏菌的光滑型菌株有荚膜;副百日咳鲍特氏菌和支气管腐败鲍特氏菌无荚膜。百日咳鲍特氏菌和副百日咳鲍特氏菌无鞭毛、不运动;支气管腐败鲍特氏菌具有周身鞭毛,在18—24℃有动力而在37℃不能运动。2、该菌属为专性需氧菌,百日咳鲍特氏菌初次分离时营养要求较高,需要有谷氨酸、L—脯氨酸、半胱氨酸及菸酸等营养物质,但不需要X和V因子。在生长过程中形成过多的脂肪酸、重金属盐和H2O2等物质能抑制其生长,因此在培养基中需加入血液、活性炭和离子交换树脂等物质来吸附多余的有害物质,故该菌只能在鲍—金二氏培养基上生长,在普通琼脂、麦康凯琼脂、巧克力色血琼脂及兔血琼脂上均不能生长。副百日咳鲍特氏菌和支气管腐败鲍特氏菌营养要求不高,在上述培养基上均能生长。3、该菌属细菌不分解糖类。其它生化反应见下表。(五)、金氏杆菌属主要特性:1、本属细菌为GN球杆菌,多成双排列,有时呈短链状;无芽孢、无鞭毛、不运动。2、营养要求较高,在不含血液的培养基中(如O/F培养基)须加入马血清才能生长;不需要X或V因子。3、在含血清的液体培养基中弱发酵葡萄糖。4、氧化酶阳性,触酶阴性,靛基质阳性,不利用枸橼酸盐。(六)、不动杆菌属不动杆菌属隶属于奈瑟氏菌科。该属是分类和命名变化最大的一类细菌。最初被称为“米马菌”;后又相继称为“醋酸钙细球菌”、“奈瑟氏球菌”、“Herella菌”、“莫拉氏菌”等。曾列入“米马菌族、无