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第九章不发酵革兰阴性杆菌不发酵革兰阴性杆菌葡萄糖O\F反应结果不发酵菌主要特点肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别常见不发酵革兰阴性杆菌的初步分群鉴定第一节假单胞菌属假单胞菌属共同点二铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌--形态染色(一)生物性状形态染色性:革兰阴性菌杆,呈球杆状或长丝状,长短不一,单个或短链排列。无芽胞,无荚膜,单端单鞭毛,运动活泼。培养特性:专性需氧,4℃不长,42℃可生长。血平板:典型的菌落扁平、湿润、毛玻璃样、金属光泽、有透明的溶血环、生姜味、菌落和培养基灰绿色普通平板:可产多种色素,主要有:绿脓素(兰绿色,可溶于水)和荧光素(即青脓素,黄或黄绿色,只溶于水)。从临床标本中分离的菌株大多产生此色素(90%)铜绿假单胞菌在血琼脂平板上的菌落特征(18-24h)80-90%产生绿脓素和荧光素铜绿假单胞菌绿脓素麦康凯上可形成5种不同形态的菌落:①典型型:灰绿色,大小不一,扁平湿润,边缘不齐,表面可见金属光泽。②大肠菌群型:圆形凸起,灰白色半透明。③粗糙型:菌落中央凸起,边缘扁平,表面粗糙。④侏儒型:细小无光泽,半透明菌落⑤粘液型:光滑凸起呈粘液状生化反应:氧化酶+,O/F上能氧化分解葡萄糖、木糖产酸、精氨酸双水解酶+,枸橼酸盐+,硝酸盐+。抵抗力:较强,临床分离株对多种抗生素耐药葡萄糖O\F反应结果(二)致病性:可产生多种致病物质:菌毛、荚膜、胞外酶和溶血物质、内毒素、外毒素.除自然界外,也存在于人体皮肤上及与外界相通的腔道中。多为继发感染,如烧伤后的创面感染,也可引起肺炎、脑膜炎、尿道感染,严重时可引起败血症,死亡率甚高。(三)微生物学检验1、显微镜检查:标本直接涂片革兰染色镜检;鞭毛染色镜检2、培养:标本接种血平板、Mac平板分离培养,血标本先增菌,再转种3、鉴定:初步鉴定:菌落特征、水溶性绿色色素、生姜气味、氧化酶、O/F全面鉴定:色素不典型者需全面鉴定铜绿假单胞菌--检验程序荧光假单胞菌恶臭假单胞菌42℃生长第二节伯克霍尔德菌属马勒伯克霍尔德菌与伪马勒伯克霍尔德菌生物学特性洋葱伯克霍尔德菌三、嗜麦芽窄食单胞菌临床意义生物学性状嗜麦芽窄食单胞菌菌的菌落形态生化鉴定:氧化酶阴性O/F氧化型有动力液化明胶水解七叶苷赖氨酸脱羧酶阳性氧化分解麦芽糖DNA酶阳性药物敏感试验及结果解释洋葱与嗜麦芽的鉴别第四节不动杆菌一、生物学性状形态与染色革兰阴性球杆菌,常成双排列,不易退色,多数有荚膜、无芽孢、无鞭毛。培养特性专性需养,营养要求不高。最适温度35℃,鲍曼不动杆菌42℃可生长。血平板上圆形凸起、2~3mm,光滑、边缘整齐、灰白色的菌落,部分菌落呈黏液状(溶血不动杆菌可形成β-溶血环);不产生色素。麦康凯平板形成粉红色菌落。革兰阴性球杆菌,常成双排列,不易退色鲍曼不动杆菌在血琼脂平板上的菌落特征(18-24h)生化反应触酶阳性,葡萄糖O/F为氧化型。氧化酶(—)硝酸盐还原(-)。动力(-),生化三阴。二、致病性该菌广泛存在于自然界,属条件致病菌,也是医院感染的常见病菌之一,常引起呼吸道、消化道和泌尿生殖道感染。三、鉴定(1)直接镜检:染色为革兰阴性球菌或球杆菌,成双排列。(2)生化反应:氧化酶(-),硝酸盐还原(-)。动力(-),不发酵葡萄糖。符合上述即可判定为不动杆菌属的细菌。4.两种不动杆菌的鉴别第五节产碱杆菌属产碱杆菌属--主要特征产碱杆菌属--鉴定要点第六节黄杆菌科黄杆菌:黄色色素第七节莫拉菌属微生物特性微生物检验微生物检验第六节军团菌属分类临床意义临床意义生物学特性微生物检验核酸检测:是快速特异的方法,采用DNA探针及PCR扩增rRNA的方法均可用于军团菌的快速诊断抗体检测:是检测军团菌感染临床常用手段,常采用方法:IFA、MAA、TAT、ELISA法等非发酵菌42℃生长思考题:1、什么叫非发酵菌?有何特点?2、铜绿假单胞菌在形态和培养特性有何特性?如何鉴定铜绿假单胞菌?3、如何鉴定不动杆菌?测验1测验2测验3测验4