常见肿瘤动物模型一览ppt课件.pptx

常见肿瘤动物模型一览肿瘤动物模型一、自发性肿瘤动物模型常用肿瘤模型小鼠肿瘤自然发生率自发性肿瘤动物模型的优点自发性肿瘤动物模型的缺点二、诱发性肿瘤动物模型用于诱发实验性肿瘤的动物种类很多，以啮齿动物的使用最多、应用最广，包括各种大鼠、小鼠、豚鼠等物理方法：放射性物质致瘤，用放射线照射或局部注射放射性同位素。化学方法：使用化学致癌物，如苯并芘（benzpyrene）、甲基胆蒽（MC）、联苯胺（benzidine）、亚硝胺类（nitrosamine）、黄曲霉素类（aflatoxin）等。生物方法：用能诱发动物肿瘤的病毒致癌，如：小鼠白血病病毒，SV40病毒。用转基因的方法诱发动物产生肿瘤，可根据启动子类型的不同选择不同的发瘤器官，如用乳球蛋白启动子的SV40T抗原的转基因小鼠，可诱发乳腺癌或胰腺癌。MMTV-Wnt-1转基因小鼠高发乳腺癌。原位诱发致癌物直接与动物靶组织或靶器官接触而诱发该组织或器官发生肿瘤。异位诱发将与致癌物接触后的动物组织或器官埋置于该动物或另一正常动物皮下而产生的该组织或器官的肿瘤。1.涂抹法（皮肤癌）2.经口给药法（消化道或消化腺)3.注射法4.气管灌注法（肺癌）5.穿线法6.埋藏法1.肺癌（Carcinomaofthelung)[简述]：在实验功物身上诱发肺癌，要比诱发其他肿瘤困难得多，诱癌率低，呼吸道给药的方法常常诱发多种肺外肿瘤而不是肺肿瘤。[方法]：①二乙基硝胺(DEN)诱发小鼠肺癌：小鼠每周皮下注射1％DEN水溶液1次，每次剂量为56mg／kg；②乌拉坦诱发肺腺癌：小鼠(A系，1-1.5月龄)每次每只腹腔注入马拉坦生理盐水液0.1-0.3ml，间隔3-5日再注，共注2-3个月每只小鼠用量约为100mg[特点]：①DEN总量达868mg，观察时间为100天，发癌率可达40％，DEN总量达1176mg，观察时间为半年时，发癌率可达94％，其中支气管鳞状细胞癌占41％。②乌拉坦注后3个月肺腺癌发生率为100％，且多数为多发性，诱发肺肿瘤的部位和组织分型与人类肺肿瘤相近似。2.食管癌（Carcinomaofesophagus)[简述]：亚硝胺在体内经过代谢，产生重碳烷，使核酸或其他分子发生烷化而致癌．不对称亚硝胺口服或胃肠外给药，均能诱发大鼠食管癌。[方法]：①甲基苄基亚硝胺(MBNA)诱发食管癌：将1％MBNA溶液加在少量的粉末状饲料中，搅拌均匀，出1月龄以上Wistar大鼠自由摄食．结药量每天0.75～1.5mg/kg②二烃黄樟素诱发大鼠食管癌模型：在大鼠饲料中加入微量（1/2500～1/10000）黄樟素喂养大鼠诱发率达20％一70％[特点及应用]：MBNA诱发的食管癌可见食管鳞状细胞癌的组织，但很少发生转移；亚硝胺致癌性较强，大剂量1次给药，即可致癌。3.肝癌（Carcinomaoftheliver)[简述]：常用口服致肝癌的物质有乙基亚硝胺(DEN)，4-2甲基氨基偶氮苯(DBA)、2-乙酰氨基酸(2AAF)．亚胺基偶氮甲苯OAAT和黄曲霉素。[方法]：①DEN诱发大鼠肝癌：取体重250g左右的封闭群大鼠给与0．25％DEN水溶液0．25-1mL灌胃或稀释10倍放在饮水瓶中自由饮水，剂量为每天2-10ml/kg，喂养半年左右②黄曲霉素诱发大鼠肝癌：每月饲料中含0．001～0.015mg/kg混入饲料中喂6个月左右。[特点及应用]：DEN诱发大鼠致癌率为70％．DBA诱癌率为60％，黄曲霉素诱发大鼠肝癌发生率为80％，此种方法从病因学角度分析，与人体肿瘤较为近似，故此类模型常用于肿瘤特点的深入研究。4.宫颈癌（Carvicalcarcinoma)用穿线法将附有0.1mg二甲基胆蒽（DMC）的棉沙线结穿入雌性小白鼠的宫颈部，并固定缝线。观察半年左右处死动物，取宫颈组织。三.移植性肿瘤动物模型及其研究方法接种方法（无菌操作）瘤块接种法瘤细胞悬液接种法瘤细胞悬液接种法2.腹水瘤肿瘤细胞的冻存与复苏四.人体肿瘤异种移植性肿瘤模型裸小鼠作为移植宿主观察指标与疗效评价：1.动物在接种肿瘤后6周左右形成1g以上的瘤块（平均瘤重），则表明移植肿瘤成功2.如出现20%小鼠的瘤重小于400mg，则表示肿瘤生长不良3.在药物治疗期间，如给药组小鼠死亡率超过20%或剥取肿瘤后平均体重下降超过15%（自身对照），表示药物存在毒性，应当减量重新实验4.药效可根据给药后瘤重抑制率来评价，瘤重抑制率大于30%，并经统计学处理组间差异具有统计学意义时，表示该受试药有苗头。重复3次，如疗效稳定，评定该药有一定疗效注：肿瘤模型形成时间较长，需30~40d甚至更长。在异种移植瘤实验中，还有一种正位移植，即将人癌组织或细胞按其在人体内的原发部位，接种于相应的器官，有别于通常的皮下接种（异位接种）免疫功能抑制的大鼠作为移植宿主Than