微生物工程菌种与种子扩大培养.pptx

第一章：菌种与种子扩大培养微生物工业用菌种种子扩大培养影响种子质量的主要因素二、工业化菌种的要求2、氨基酸生产有关的微生物HD:高丝氨酸脱氢酶氨基酸生产菌的要求：3、食品酶制剂生产有关的微生物四、菌种分离与保藏2、采样时要注意的问题富集的三种方案：定向培养的方法定向培养的富集方法4、菌落的选出例：醛肟水解酶的筛选5、目的微生物富集方法的研究进展六、菌株选育与分子改造方法自然状态下，碱基对发生自然突变的机率为10-8～10-9自然选育操作步骤：2、诱变育种（2）、诱变剂处理过程中几个有关的问题（3）、诱变育种的一般步骤(p83)HD:高丝氨酸脱氢酶黄色短杆菌F9-50的诱变谱系3、基因的直接进化(directedevolution)七、生产用菌种的保藏与复壮（一）、菌种保藏1、概念：根据菌种的生理生化特点，人工地创造条件，使其代谢活动处于不活泼状态。2、不同情况、不同菌种采用不同方法。斜面低温保藏法（如酵母菌）石蜡油封保藏法（如酵母菌）砂土保藏法（如放线菌）硅胶保藏法冷冻干燥保藏法（如一般细菌）液氮超低温冻结法（如真菌）（二）、防止菌种衰退的措施（1）、菌种的衰退发酵力的下降繁殖力的下降发酵产品的得率降低（2）、衰退的原因菌种保藏不妥菌种生长的要求没有得到满足遇到不利的条件失去某些必要的条件发生回复突变（3）、防止衰退的方法做好菌种的保藏工作尽可能满足生长条件尽量减少传代次数（4）、菌种的分离复壮普通方法：稀释平板法或平板划线法分离单细胞菌落芽孢杆菌：先将菌液沸水处理数分钟，再用平板进行分离改变培养条件：如单细胞分离仍效果不佳，可考虑改变培养温度条件，以利高产菌株生长而不利低产菌株生长返回第二节种子的扩大培养种子扩大培养是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。种子扩培的目的二、工业微生物的培养类型三、影响种子质量的因素（一）、种子制备的过程（二）、实验室阶段获得一定数量和质量的孢子2、培养基选择的原则3、起始接种物的传代问题母瓶：活化、纯化，使保藏菌种生长，并去处变异株。所以接种时要稀一点、便于纯化生长到单菌落。（三）、生产车间阶段2、培养基选择的原则例：柠檬酸发酵薯干粉3、发酵级数的确定发酵级数确定的依据4、接种量的确定5、种龄6、温度7、pH值8、通气和搅拌9、泡沫10、染菌的控制11、种子的质量要求：四、种子制备过程举例1、斜面(AS1.299)2.一级种子（摇瓶）3.二级种子(种子罐)种子的质量要求：（二）、青霉素生产的种子制备1、斜面孢子2、大米孢子3、一级种子种子的质量要求