基因工程原理练习题及其答案【实用文档】doc.doc

基因工程原理练习题及其答案【实用文档】doc文档可直接使用可编辑，欢迎下载基因工程复习题题型：名词解释(10个）3０分；填空（每空１分）20分；选择题(每题1分）１0分；简答题（4个）20分;论述题（2个）20分。第一章绪论1．名词解释：基因工程：按照预先设计好的蓝图,利用现代分子生物学技术，特别是酶学技术，对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造，将一种生物(供体）的基因转移到另外一种生物（受体)中去，从而实现受体生物的定向改造与改良。遗传工程广义：指以改变生物有机体性状为目标，采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作,以改良品质或创造新品种。包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。狭义:基因工程。克隆：无性（繁殖）系或纯系。指由同个祖先经过无性繁殖方式得到的一群由遗传上同一的DＮA分子、细胞或个体组成的特殊生命群体。2．什么是基因克隆及基本要点?３。举例说明基因工程发展过程中的三个重大事件.A）限制性内切酶和ＤＮA连接酶的发现（标志着ＤNA重组时代的开始)；B)载体的使用；C）１９70年,逆转录酶及抗性标记的发现。4.基因工程研究的主要内容是什么？基础研究：基因工程克隆载体的研究基因工程受体系统的研究目的基因的研究基因工程工具酶的研究基因工程新技术的研究应用研究:基因工程药物研究转基因动植物的研究在食品、化学、能源和环境保护等方面的应用研究第二章基因克隆的工具酶1.名词解释:限制性核酸内切酶：一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列，并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶.回文结构：双链DＮＡ中的一段倒置重复序列，当该序列的双链被打开后,可形成发夹结构。同尾酶:来源不同、识别序列不同，但产生相同粘性末端的酶。同裂酶:不同来源的限制酶可切割同一靶序列和具有相同的识别序列黏性末端：DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合，这样的DNA末端，称为粘性末端。平末端:DNA片段的末端是平齐的。限制性核酸内切酶的酶活性单位（U）：在酶的最适反应条件下，在50μｌ容积中,６0分钟内完全切割１mgｌＤNA所需的酶量为1个酶活性单位（ｕnｉt或Ｕ)限制性核酸内切酶的星活性:指限制性内切酶在非标准条件下，对与识别序列相似的其它序列也进行切割反应,导致出现非特异性的DNA片段的现象。连杆（linkeｒ）：化学合成的8~12个核苷酸组成的寡核苷酸片段.以中线为轴两边对称，其上有一种或几种限制性核酸内切酶的识别序列,酶切后可产生一定的粘性末端，便于与具有相同粘性末端的另一DNA片段连接。衔接头(aｄaｐtor）：化学合成的寡核苷酸，含有一种以上的限制性核酸内切酶识别序列。其一端或两端具有一种或两种内切酶切割产生的黏性末端。底物位点优势效应:酶对同一个DＮＡ底物上的不同酶切位点的切割速率不同。激酶：对核酸末端羟基进行磷酸化的酶.2．说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。用属名第一个字母和种名的头两个字母组成的３个字母斜体的略语表示寄主菌的物种名以及菌株（型）的代号命名。该菌株（种）中发现的不同的酶按照顺序以罗马字母编号I,IＩ,IＩＩ等.如：Eschｅrｉchiacoli用Eco表示。第四个字母代表菌株或株型、变种名，若酶存在于质粒上，则需大写字母表示非染色体遗传因子。例：HindＩII从流感嗜血菌株(ＨaemophilｕsInflｕｅnzuｅ)d株中分离的第三个酶。EcoRI表示基因位于Eschericｈｉａcoli中的抗药性R质粒上。前三个字母用斜体,其他用正体表示.如果酶存在于一种特殊菌株中,三个字母后加上菌株名称符号，名称最后部分往往包含罗马数字，表示在该特殊菌株中发现这种酶的先后次序。３。引起限制性核酸内切酶星活性的可能因素有哪些？若使用buffer不当,会有sｔarａcｔｉvitｙ，而ｓtaｒａcｔiviｔｙ是指限制酶对所作用的DＮＡ及序列失去专一性，当酶辨认切割位置的能力降低，导致相似的序列或是错误的辨认序列长度也会作用,而产生错误的结果。所以当DNＡ同时以两种限制酶处理时，选择可使两种酶之活性反应均可达75﹪以上的rｅstrictionbuffeｒ，若找不到适当的ｂｕffer则先加低盐的buffer使其中一酶作用后，在加入高盐buｆfeｒ使另一酶作用，若无法以盐的高低分别加入不同的bｕｆfer，则先加入一种bufｆer作用后,加3MNａOAc/95﹪aｌcoｈoｌ沉淀DＮA，再加另一种buffer作用。４．DNA片段之间的连接方式有哪些?具黏性末端的DNA片段之间的连接、具平末端ＤＮA片段之间的连接、DNA片段末端修饰后进行连接、DNA片段加连杆（linker）后的连接。5。什么是Ｋlenoｗ酶？有哪些活性?在基因工程中有什么作用？KlenowDＮA聚合酶是