第七章需氧和兼性厌氧球菌的鉴定.ppt

学习目标及重点概述第一节葡萄球菌属一、生物学特性1.形态与染色本属菌多为球形，直径0．5～1．5um。葡萄球菌无鞭毛，无芽胞、无荚膜（1）在液体培养基上：呈单个、成双或短链状排列（2）在固体培养基上：呈葡萄串状排列（3）脓汁标本中：呈单个散在或少数呈葡萄串状排列第一节葡萄球菌属第一节葡萄球菌属第一节葡萄球菌属（4）在高盐甘露醇平板上：大多数葡萄球菌耐盐性强（10%～15%g/LNaCl培养基中生长）。此平板常作为选择性培养基，菌可分解甘露醇使指示剂呈淡黄色。G-菌在此平板上不生长第一节葡萄球菌属第一节葡萄球菌属第一节葡萄球菌属第一节葡萄球菌属二、临床意义第一节葡萄球菌属微生物检验程序1.标本：主要有血液、尿液、痰液、脑脊液、穿刺液和浓液等。3.增菌培养血液标本增菌培养，24h培养后每日观察增菌液变化。如无变化，需培养7d，其中盲目传代2次，如无细菌培养可报“血液标本经7d培养无菌生长”。如发生混浊、内有胶胨样凝块等现象可进行进一步分离培养和革兰染色5.生化反应：（1）触酶试验：阳性。5.生化反应（3）耐热DNA试验5.生化反应5.生化反应5.生化反应（8）其它非培养鉴定或检查方法：1）免疫学方法：用ELISA或对流免疫电泳方法检测金黄色葡萄球菌磷壁酸抗体2）分子生物学方法：用商品化Accu探针对培养物进行鉴定，用脉冲场凝胶电泳法（PFGE）对葡萄球菌的质粒和染色体进行限制性核酸内切酶分析等6.药敏试验6.药敏试验7.鉴定按科→属→种的顺序（1）科间鉴别7.鉴定按科→属→种的顺序菌名第二节链球菌属1.形态与染色G+球菌，直径0.5～1um（1）液体培养基中链状排列，长短不一。短由4～8个菌组成，长者可达20～30个细菌组成（2）在固体培养基或脓汁标本中，呈短链、成双或单个散在排列链球菌幼龄时可见荚膜，继续培养荚膜消失肺炎链球菌常常呈双排列，故又称为肺炎双球菌。在动物体内它可形成较厚的荚膜链球菌属无鞭毛、无芽胞2.培养特性营养要求高，在5%～10%CO2环境下生长更好3.生化反应生化活性较活跃：触酶阴性，葡萄糖+，菊糖－3.生化反应3.生化反应4.分类根据下述链球菌的溶血特征和Lancefield血清学等传统的分类法，目前仍然是临床实验室鉴定链球菌的常规使用方法。（2）根据抗原结构分类：链球菌Ag结构较复杂，含多种抗原，主要有：（4）综合溶血性、抵抗力、生化反应性状分类二、临床意义溶血毒素O：耐热，含-SH基的蛋白质，对氧敏感，易被氧化成-S-S，失去溶血能力溶血毒素S：多肽，分子量少，对氧稳定，血平板上的溶血现象由它引起检测抗“O”抗体，可辅助诊断链球菌性疾病如风湿热及链球菌感染后的肾小球肾炎第二节链球菌属微生物检验程序1.标本采集：标本类型有血液、尿液、创伤标本、脓性分泌物等三、微生物学检验5．鉴定实验链球菌属细菌的鉴定应根据其菌体形态、菌落形态和溶血特征，结合以下鉴定试验进行。5．鉴定实验Lancefield血清学凝集试验甲型溶血性链球菌和丙型链球菌鉴定到肺炎链球菌、D群链球菌，其他的统称为草绿色链球菌。青霉素6.5%NaCL肉汤生长D群链球菌S-肠球菌R+（3）其他鉴定试验1）链激酶A群+2）牛乳美蓝试验粪链、乳链不被抑制3）马尿酸钠水解试验B群+4）肺炎链球菌荚膜肿胀试验+微生物检验程序1.标本采集：根据临床症状及体征采集标本，标本类型有血液、尿液、创伤标本、脓性分泌物等三、微生物学检验奈瑟菌属是一群专性需氧革兰阴性球菌，奈瑟菌属中对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌，引起流行性脑脊髓膜炎和性病淋病。脑膜炎奈瑟菌巧克力平板上的脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌二、临床意义单纯淋病（男）单纯淋病（女）三、微生物学检验（1）标本采集根据临床症状和体征不同采集不同标本，如血液、瘀斑渗出液、脑脊液、鼻咽分泌物。（2）直接涂片，染色镜检：脑脊液离心沉淀涂片，或刺破瘀斑血或组织液印片，革兰染色镜检，发现中性粒细胞内、外革兰阴性双球菌，呈肾形成双排列，可做出“查见革兰阴性球菌”的初步报告（4）分离培养：其他标本直接分离于血琼脂平板、巧克力平板或EPV平板，置5%～10%CO2环境中，经35℃～37℃培养18h～24h后观察菌落特征脑膜炎奈瑟菌A群单价血清凝集试验左侧为阳性反应，右侧生理盐水对照青霉素S、利福平S、磺胺R三、微生物学检验（1）标本采集：采集脓性分泌物、尿道拭子、宫颈口分泌物、结膜分泌物、血液（2）直接涂片，染色镜检：将脓性分泌物直接涂片、革兰染色镜检，如在中性粒细胞内发现革兰阴性双球菌时，结合临床症状可以做出初步诊断（4）分离培养：其他标本直接分离于血琼脂平板、巧克力平板或EPV平板，置5%～10%CO2环境中，经35℃～37℃培养18h～24h后观察菌落特征②确定性鉴定：糖发酵试验并参考生长试