HPLC实验步骤和方法开发.ppt

液相色谱的应用以及方法开发提纲：一.HPLC的广泛应用HPLC的广泛应用HPLC的应用领域HPLC的应用领域HPLC的应用领域HPLC的应用领域二.方法开发的过程第一步干什么?分析时要了解哪方面的情况？分离(制备)时要了解哪方面的情况？使用文献方法注意点一）选择HPLC检测器用于HPLC的检测器理想的HPLC检测器灵敏度：信噪比选择液相色谱的检测器选择液相色谱的检测器吸光度（UV/Vis）检测原理背景吸收的影响光电二极管矩阵检测器（PDA）的特点和用途荧光（Fluorescence）检测原理荧光检测器原理荧光检测器的应用示差折光（RefractiveIndex）检测示差折光（RI）检测的原理示差检测器的应用ELSD－优点及应用领域ELSD－缺点二）色谱基本分类分配色谱分配色谱的分离机理分配色谱概述流动相极性流动相洗脱强度流动相的选择原则三）方法开发的具体步骤反相色谱的方法开发1.改变容量因子K’2.调节α值改变选择性离子型化合物的色谱分离3.离子抑制色谱离子抑制色谱实例离子抑制色谱的使用范围4.离子对色谱法离子对色谱机理离子对色谱的应用离子对色谱分析水溶性维生素用离子对、还是用离子抑制方法？方法开发的其他因素色谱方法转换四）液相色谱方法开发在这一部分您将学习:液相色谱泵梯度的洗脱方式梯度滞后：系统体积的影响梯度滞后大小的影响滞后体积变化的影响色谱柱反压变化对梯度实验的影响梯度洗脱的特点一般流出问题AnalyticalEducationCenter梯度运行中发生了什么?梯度方法开发-优化溶剂梯度0梯度形状AnalyticalEducationCenter梯度平衡时间的影响（一）梯度平衡时间的影响（二）改变流速流出顺序变化-一个梯度洗脱现象正确的柱长是多少?结论开发液相色谱方法的考虑因素