下代测序技术简介专家讲座.pptx

Sanger测序NGS=NextGenerationSequencing当前NGS主要三种测序仪器罗氏/454Roche454测序原理Roche454测序步骤Roche454测序步骤Roche454测序步骤Roche454测序步骤乳液PCR（emRCR）Roche454测序步骤下代测序技术简介专家讲座Roche454测序步骤在454测序仪中，A、T、G、C四种碱基是分别存放在单独试剂瓶中，每步反应四种碱基依次加入反应池，当碱基配对结合，就会释放出一个焦磷酸（PPi），而这个焦磷酸在酶作用下，将荧光素氧化成氧化荧光素，并发出光信号，从而读取出这一位置碱基信息。Illumina测序原理Illumina测序流程桥式PCR合成法测序数据读取ABISOLiD测序原理ABISOLiD测序流程ABISOLiD连接测序原理ABISOLiD连接测序原理ABISOLiD连接测序原理ABISOLiD连接测序原理454平台突出优势是读长。当前454系统序列读长已超出400bp。即使454平台测序成本比其它平台要高很多，不过对于那些需要长读长应用，如从头拼接和环境微生物组学，它仍是最理想选择。1.无以伦比通量当前SOLiD3系统单次运行能产生50GB人基因组序列数据，相当于基因组17倍覆盖度，这显然是其它任一台新一代测序系统都无法到达2.准确性。新超准确检测模块（ECC模块）将提供高达99.99%准确性；多达98%可定位碱基质量值高于45；更多标签以提升灵敏度和动态范围；高准确性原始读序，支持无参考序列数据分析。企业太平洋生物科学企业（PacBio’s）实时单分子测序方案示意图。A.单个零点开启模式波导纳米结构侧面图，每个纳米结构含一个DNA聚合酶分子，固定于底部玻璃面上。波导纳米结构和共焦成像系统确保只对底部进行荧光检测。B.显示了荧光标识核苷酸底物掺入测序模板过程。对应瞬时荧光探测分为5个步骤。LifeTechnology企业CompleteGenomics企业