裸鼠成瘤专题知识讲座.pptx

裸鼠成瘤专题知识讲座裸鼠裸小鼠(基因符号nu):无毛(hairless),无胸腺(athymus).幼鼠(3－4周龄),成年鼠(6－8周龄。抵抗力差，易在SPF环境下可生存，所用笼具、垫料、饲料、饮水患病毒性肝炎和肺炎，因而喂养和繁殖要求条件比较严格，等都要求经过严密灭菌消毒并采取隔离器喂养，以确保长久存活并进行繁殖。裸大鼠(基因符号rnu)：普通特征似裸小鼠，但躯干部仍有稀少被毛并非象裸小鼠那样完全无毛，头部及四肢毛更多。裸大鼠易患呼吸道疾病。即使说以裸大鼠代替裸小鼠，含有移植肿瘤大，取血量多，可行一些外科小手术等优点。所以比裸小鼠有一定优越性，其缺点是维持经费比裸SPF小鼠更高，另外裸大鼠当前不怎么流行。所以咱们试验室常见是BALB/c-nu裸小鼠。伴随裸小鼠年纪增加或相关原因影响(如病毒感染),裸鼠体内正常T细胞会增加，故接种肿瘤试验普通采取4--6周龄裸鼠。常规较轻易成瘤细胞：Hep-G2（肝癌，Hep2（喉癌），NCI-H460(大细胞肺)，A431(表皮癌),SK-OV-3（卵巢癌），MCF-7（乳腺癌），A375/B16-F10（人黑色素瘤细胞）。1、慢病毒保留理论上慢病毒可在-80℃保留6个月，在4℃可保留3天。因为慢病毒每次冻融会降低病毒滴度10%，所以慢病毒试验最好是提前分装。2、MOI值细胞感染到达80%以上所需MOI值，这个大个别细胞是能够查到，不过因为因为慢病毒感染细胞是很灵活，所以MOI值选择也是很有差异性，详细情况详细分析。附：慢病毒使用量相关计算公式附：一些细胞慢病毒感染效果图K562A549细胞培养：细胞状态以及数量是裸鼠皮下成瘤很关键一步。细胞状态良好，对数生长久，接种很轻易形成肿瘤，反之则会造成失败。即浪费了细胞，又错过了裸鼠成瘤最正确时期裸鼠成瘤附：咱们试验一些裸鼠成瘤成功案例裸鼠皮下成瘤后，除了一些常规检测外咱们普通可进行以下一些试验操作：1、裸鼠品系。2、裸鼠成瘤用材料：细胞选择。3、客户详细要求：比如说肿瘤形成部位，是否需要详细统计肿瘤大小改变，是否需要取材后需要怎么拍摄裸鼠照片等等。