三角褐指藻户外高密度培养技术研究大学本科毕业论文.doc

本科毕业设计（论文）题目：三角褐指藻户外高密度培养技术研究学院轻工与食品学院专业食品科学与工程（糖工程）学生姓名魏峰学生学号200930401131指导教师魏东教授提交日期2013年06月03日ⅡI摘要三角褐指藻（Phaeodactytuumtricornutunm）是一种常用的海水经济硅藻，生长迅速，易于培养，富含丰富的多不饱和脂肪酸，特别是二十碳五烯酸（C20:5，EPA），是水产动物养殖的优质饵料。目前，三角褐指藻的户外高密度培养技术仍处于研发阶段。为探究不同条件（环境条件和营养盐）对三角褐指藻生长以及其脂肪酸组成和含量的影响，本研究用单一变量法分别对其培养条件进行对比优化实验。主要结果如下：（1）选用不同盐度的培养基对三角褐指藻进行户外高密度培养，盐度设定为3个梯度，20‰、25‰、30‰。结果表明，在盐度为20‰条件下，三角褐指藻的生长状况要优于其他两种盐度，其OD值最高为0.998、细胞密度最高为6.0106个/mL、细胞干重最高为177.78mg/L。对脂肪酸的测定结果表明，25‰盐度下三角褐指藻细胞的脂肪酸含量最高（124.95mg/g），20‰盐度与25‰盐度基本相同（123.12mg/g），而30‰盐度最低（105.67mg/g）。（2）在20‰盐度下，通入CO2控制培养基的不同pH值，对三角褐指藻进行户外高密度培养。pH值设定为3个梯度，7.5、8.0、8.5。结果表明，控制pH8.0，三角褐指藻的生长状况要远好于其他两种pH值，其OD值最高为1.045、细胞密度最高为5.8106个/mL、细胞干重最高为166.39mg/L。对脂肪酸的测定结果表明，pH值为8.5时三角褐指藻细胞的脂肪酸含量最高（145.91mg/g），pH值为8.0的稍低（134.92mg/g），pH值7.5的脂肪酸含量最低（109.76mg/g）。（3）在20‰盐度、pH8.0条件下，分别选用碳酸氢铵和尿素作为氮源对三角褐指藻进行户外高密度培养。结果表明，分别使用碳铵和尿素，三角褐指藻的生长状况基本相同，其最终OD值分别为0.689和0.716，细胞密度分别为3.9106个/mL和4.0106个/mL，细胞干重分别为136.11mg/L和146.11mg/L。但通过对脂肪酸的测定，结果表明当使用碳铵作为氮源时三角褐指藻细胞的脂肪酸含量最高（169.72mg/g），尿素作为氮源时脂肪酸含量则相对较低（109.76mg/g）。（4）在20‰盐度，pH8.0，碳铵作为氮源的条件下，当培养基中氮耗尽时，通过一个昼夜24小时对三角褐指藻的取样研究，结果表明，在上午10点钟时，三角褐指藻中所积累的脂肪酸含量最高（136.15mg/g），而在其他时间段，脂肪酸的含量则相对较低。（5）在20‰盐度，pH8.0，碳铵作为氮源的条件下，通过对三角褐指藻的一个生长周期内的氮磷同化规律研究表明，三角褐指藻户外高密度生长过程中，对氮的需求需求量很大，平均每天要消耗10.4mg/L的碳酸氢铵。而对磷的需求则相对较小，每天平均只消耗0.13mg/L的磷酸二氢钠。关键词：三角褐指藻；盐度；pH值；氮源；脂肪酸AbstractPhaeodactytuumtricornutunmisacommonlyusedseawatereconomicdiatoms,rapidgrowth,easytoculture,richinpolyunsaturatedfattyacids,especiallyeicosapentaenoicacid(C20:5,EPA),isAquaticanimalbreedingqualitybait.Currently,Phaeodactylumoutdoorhigh-densityculturetechnologyisstillindevelopmentstage.Toexplorethedifferentconditions(environmentalconditionsandnutrients)onthegrowthofPhaeodactylumandtheirfattyacidcompositionandcontentof,asinglevariablemethodusedinthisstudyweretocomparetheircultureconditionsoptimizationexperiments.Themainresultsareasfollows:(1)selectionofdifferentsalinitymediaonPhaeodactylumoutdoorhigh-densityculture,salinitygradientissetto3,20‰,25‰,30‰.Theresultsshowedthatund