微生物遗传育种基因重组和育种.pptx

重组与突变不一样点：突变是指一个细胞同一个基因组中某一点或某一DNA片段发生变异；而重组是来自两个细胞不一样基因组间遗传物质交换结果，重组可在微生物细胞不发生突变情况下形成新基因型与表型。杂交（Hybridization）:是指不一样基因型亲本个体或细胞（指单细胞生物）交配而产生子代过程。第一节细菌、放线菌接合及育种（一）接合现象发觉对接合现象解释：（二）接合作用证实2、互养排除3、回复突变排除4、异核体和杂合二倍体排除（三）接合机制2、F因子存在3、F因子及F＋细胞特征F因子基因组有三个主要基因丛，分别负责插入、复制和转移功效。B.复制区（replication-region）：位于F因子结构图谱40～49kb，包含一个特异复制蛋白基因frp（Freplicationproteins）、决定不相容性基因inc（incompatibility）和一个复制起始点oriV（vegetativeoriginofreplication）。F因子主要表现型是细胞表面有性菌毛，即F＋细胞表面都有性菌毛。F性菌毛分布在大肠杆菌表面，数目与F因子相当，长度为1～20um。性菌毛功效：A.是两性细胞接合时转移DNA通道，又叫性纤毛桥（sexpilibridge）；B.又是特异phage吸附部位。4、接合时DNA转移机制（四）F因子三种存在形式3、F′：携带有部分核染色体基因F′因子，含有F′因子菌株称为F′菌株。（五）三种“雄性”菌株与F－接合后结果2、Hfr×F－Hfr＋F－3、F′×F－2F′F′菌共同特征F因子转导：经过F′因子转移而使受体菌改变它遗传性状现象称为F因子转导或或性因子转导或简称性导（Fduction或sexduction）（六）中止杂交试验1957年，E.L.Wollman和F.Jocob设计了中止杂交试验。中止杂交试验中止杂交试验结果：基因是以ori、thr、leu、azi、ton、lac、gal次序连续转移。在这个试验中，对Hfr菌条件是，str基因在整个待测次序后端，假如strs基因率先进入受体，取得重组体将在第一次选择性培养基上被str杀死。另外，thr、leu选择性标识应位于前端，如位于后端则无法测序。二、放线菌接合作用（二）放线菌性别2、认为IF相当于E.coliF＋、UF相当于E.coliF－理由3、认为NF相当于Hfr理由（三）放线菌致育因子（四）天兰色链霉菌三种致育类型与大肠杆菌三种致育类型之间区分三、采取接合技术育种第二节转化与育种一、转化过程（一）转化DNA特点2、DNA片段大小与转化子数目标关系3、单双链DNA与转化活性关系4、转化DNA命运（二）受体细胞特点（2）感受态特点和影响原因特点：感受态不是一个透性特征，而是在适当生长条件下取得一个生理特征2、感受态百分比4、感受态因子（CF）二、转化过程基因重组及育种假如a+和b+是连锁，那么当DNA浓度下降时，a+b+转化频率下降与a+或b+转化频率下降相同；相反，假如a+和b+并不连锁，那么a+b+转化频率下降将远远超出a+或b+转化频率。这是因为在DNA低浓度范围内，转化子产生与DNA浓度成正比。当a+、b+两个基因位于同一DNA片段上是，a+b+转化子与DNA浓度成正比增加；当a+b+基因分别位于不一样DNA片段上是，在一定DNA浓度内，a+b+转化子与DNA浓度平方成正比。经过这么试验检测转化基因连锁情况能够方便绘制出遗传图谱。以trp+和tyr+DNA作为供体共转指数：如将DNA加入到受体菌中，会产生、和三种转化子，将型转化子在其中所占百分比称为共转指数（cotransferindex）（二）转化育种第三节转导与育种二、转导现象发觉及证实过滤性因子是噬菌体（phage）证实：三、普遍性转导（generalizedtransduction）（一）完全普遍转导（二）流产普遍转导四、不足转导（specializedtransduction）局限转导（一）低频转导（LFT，lowfrequencytransduction）（二）高频转导（HFT，highfrequencytransduction）当转导DNA片段进入受体后，与受体同源分子进行重组，当另一个基因标识被选择时，那么另一个邻近基因发觉频率伴随它们二者之间距离降低而增大，这个频率称为共转导频率（cotransductionfrequency）。用下式表示：F＝（1－d／L）3d为两个基因之间距离，L是P1基因组或转导片段长度（在遗传图谱上用分钟表示）。比如：有两个基因共转导频率是65％，L为2分钟（约76kb）。六、转导育种转导育种过程第四节微生物原生质体融合和育种狭义原生质体（protoplast）即细胞壁被彻底酶解完全脱壁后形成1、原生质体广义原生质体既包含狭义原生质体也包含不完全脱壁后