一种网织红细胞检测试剂盒及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110243651A(43)申请公布日2019.09.17(21)申请号201810185799.4G01N21/01(2006.01)(22)申请日2018.03.07G01N21/64(2006.01)(71)申请人深圳市帝迈生物技术有限公司地址518000广东省深圳市南山区桃源街道留仙大道4093号南山云谷创新产业园南风楼2楼B(72)发明人余晓尘舒家发李春晖伍耀婵崔晓磊辛佩轩其他发明人请求不公开姓名(74)专利代理机构深圳中细软知识产权代理有限公司44528代理人安秀梅(51)Int.Cl.G01N1/31(2006.01)G01N1/38(2006.01)权利要求书2页说明书12页附图4页(54)发明名称一种网织红细胞检测试剂盒及其应用(57)摘要本发明公开了一种网织红细胞检测试剂盒，包括：染色液和足够量的稀释液，所述染色液包括特异性核酸染料和有机溶剂，所述特异性核酸染料为式3所示的化合物：所述稀释液包括缓冲剂、至少一种表面活性剂和水，所述检测试剂盒的pH值为7-11；所述表面活性剂包括两性表面活性剂，所述两性表面活性剂为咪唑啉型式4所示的化合物；同时公开了该试剂盒用于制备网织红细胞含量的测定试剂的应用。本发明所用的染料很容易进入被稀释液处理过的细胞，与分子内部与核酸物质进行结合，染料安全毒性小，使用两性表面活性剂跟非离子表面活性剂处理细胞，经染料染色后，RET成熟程度区分界限明显，结果测定准确，同时还可以测定血小板的含量。CN110243651ACN110243651A权利要求书1/2页1.一种网织红细胞检测试剂盒，其特征在于，包括：染色液和足够量的稀释液，所述染色液包括特异性核酸染料和用于溶解所述特异性核酸染料的有机溶剂，所述特异性核酸染料为式3所示的化合物：其中R1、R2、R3为小于四个碳的烷基，R4为磺酸基，X为卤素原子；所述稀释液包括缓冲剂、至少一种表面活性剂和水，所述检测试剂盒的pH值为7-11；所述表面活性剂包括两性表面活性剂，所述两性表面活性剂为咪唑啉型式4所示的化合物：R代表烷基或含8～16个碳原子的烷基。2.根据权利要求1所述的网织红细胞检测试剂盒，其特征在于：所述有机溶剂为乙二醇、甲醇、乙醇、丙醇中的一种或两种的混合物。3.根据权利要求1所述的网织红细胞检测试剂盒，其特征在于：所述缓冲剂选自Tris、HEPES、MOPS、Tricine、磷酸盐缓冲液的一种或两种混合物。4.根据权利要求1所述的网织红细胞检测试剂盒，其特征在于，所述染色液：其中，所述特异性核酸染料的浓度为0.20-1.00mmol/L；所述稀释液：其中，每1L水中含有两性表面活性剂0.2-1.5g、缓冲剂0.5-8.0g。5.根据权利要求1所述的网织红细胞检测试剂盒，其特征在于，所述染色液：其中，所述特异性核酸染料的浓度为0.50-0.80mmol/L；所述稀释液：其中，每1L水中含有的两性表面活性剂0.3-1.0g、缓冲剂4.0-6.0g；所述pH值为8-10。6.根据权利要求1～5所述的网织红细胞检测试剂盒，其特征在于，所述稀释液中还包括防腐剂，所述防腐剂包括苯甲酸及其盐、山梨酸及其盐类、苯氧乙醇、甲醛和Proclin300中的至少一种。7.根据权利要求6所述的网织红细胞检测试剂盒，其特征在于，所述稀释液中每1L水中含有的所述防腐剂0.2-4.0g。8.根据权利要求1～5任一所述的网织红细胞检测试剂盒，其特征在于，所述表面活性剂还包括非离子表面活性剂，所述非离子表面活性剂为乙二醇型的非离子表面活性剂，或2CN110243651A权利要求书2/2页者是吐温系列的表面活性剂。9.根据权利要求8所述的网织红细胞检测试剂盒，其特征在于，所述稀释液中每1L水中含有非离子表面活性0.3-0.5g。10.一种网织红细胞检测试剂盒的应用，其特征在于，将权利要求1～5任一项所述网织红细胞检测试剂盒用于制备网织红细胞含量的测定试剂。3CN110243651A说明书1/12页一种网织红细胞检测试剂盒及其应用技术领域[0001]本发明属于血细胞分析领域，主要涉及一种网织红细胞检测试剂及其应用。所述网织红细胞检测试剂盒采用了新型的无毒、高敏感性、高稳定性的核酸染料以及稀释液，可以准确的对网织红细胞进行分类。背景技术[0002]网织红细胞是红细胞的一种，介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞，其胞质中残存少量嗜碱性物质RNA，RNA含量越高，网织红细胞越幼稚。正常人的外周血中都是成熟的红细胞及少量网织红细胞(成年人：百分率，0.5％-1.5％，新生儿：百分率，3.0％-6.0％)，因此临床检验可以根据网织红细胞的成熟度及其含量判断病人的信息，主要用于判断贫血类型。[000