具有光热光动力放射增敏肿瘤治疗液金微球及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113521281A(43)申请公布日2021.10.22(21)申请号202110757553.1(22)申请日2021.07.05(71)申请人四川大学地址610065四川省成都市武侯区一环路南一段24号(72)发明人黄忠兵刘涛涛尹光福廖晓明蒲曦鸣(51)Int.Cl.A61K41/00(2020.01)A61K9/50(2006.01)A61K47/54(2017.01)A61K47/62(2017.01)A61K47/32(2006.01)A61P35/00(2006.01)权利要求书2页说明书7页附图3页(54)发明名称具有光热光动力放射增敏肿瘤治疗液金微球及其制备方法(57)摘要本发明公开了具有光热、光动力和放射增敏三种治疗肿瘤方式协同作用的液体金属微球及制备方法。先用酰胺化反应连接甲硝唑MN到聚乙二醇‑聚丙烯酸PEG‑PAA共聚链上，制得放射增敏共聚物PEG‑PAA‑MN；再用迈克尔加成反应，制备靶向肿瘤的共聚物RGD‑PEG‑PAA‑MN；用超声方法使镓基液体金属破碎为纳米微球（LM），再经靶向共聚物RGD‑PEG‑PAA‑MN在LM表面上静电包覆，制备液体金属纳米复合微球。本发明工艺简单，反应条件温和，易于操作；所制备产品具有光热、复合光动力、乏氧下低强度放射增敏三种协同治疗肿瘤的功能，还有多肿瘤靶向性、良好生物相容性、体内可降解性、肿瘤乏氧响应和酸性响应性能。CN113521281ACN113521281A权利要求书1/2页1.一种具有光热光动力放射增敏肿瘤治疗液金微球，其特征在于，所述具有光热光动力放射增敏肿瘤治疗液金微球由聚乙二醇‑聚丙烯酸共聚物PEG‑PAA、1‑羟乙基‑2‑甲基‑5‑硝基咪唑MN和精氨酸‑甘氨酸‑天冬氨酸短肽RGD以及镓基液体金属LM作为原料，经过酰胺化反应、迈克尔加成反应以及静电组装包覆而制备得到RGD‑PEG‑PAA‑MN@LM；所述肿瘤治疗液体金属微球的外层，为所述聚丙烯酸‑聚乙二醇共聚物PEG‑PAA与所述1‑羟乙基‑2‑甲基‑5‑硝基咪唑MN和短肽RGD，通过酰胺化反应和迈克尔加成反应分别连接到PEG和PAA分子链上，而得到的MN、RGD修饰的PAA‑PEG共聚分子链RGD‑PAA‑PEG‑MN，其具有靶向肿瘤和射线增敏性；所述肿瘤治疗液体金属微球的内层，为所述室温下的镓基液体金属纳米微球，具有光热和光动力特性；所述肿瘤治疗液体金属微粒，为MN、RGD修饰的RGD‑PAA‑PEG‑MN共聚分子链通过静电组装而包覆在液体金属微粒表面，亲水的短肽RGD在复合微球最外面，使肿瘤治疗液体金属微球具有靶向性；所述肿瘤治疗液体金属微球，在近红外光照射下具有光热转换效应和光动力性能，在放射性辐照下具有光动力和射线增敏性能，使得所述肿瘤治疗液体金属微球对于肿瘤具有光热、光动力和射线增敏的协同作用。2.一种具有光热光动力放射增敏肿瘤治疗液金微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：a）称量0.001~0.01g分子量1000~20000Da的聚丙烯酸（PAA），加入到装有10~30mL2‑(N‑吗啉代)乙磺酸缓冲液（MES，10Mm，pH值5.2）中；然后再将0.15~0.45g的1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC·HCl）和0.07~0.21g的N‑羟基琥珀酰亚胺（NHS）加入到该溶液中，得到溶液A；室温下活化30min后得到溶液A，再用300~900μL的三乙胺（TEA）调节A溶液的pH值至7.2，得到溶液B；将分子量1000~20000Da、一端含有马来酰亚胺基MAL、另一端含有氨基NH的聚乙二醇（Mal‑PEG‑NH，0.20.6g）加入到溶液B中；室温下反22~应48小时后，用透析袋透析以去除其中未反应物；最后冷冻干燥，得到含有马来酰亚胺端基的PEG‑PAA白色粉末；b）将0.05~0.15g、含有马来酰亚胺端基的PEG‑PAA溶解在5~15mL的二甲亚砜（DMSO）中；随后将0.041~0.123g的EDC·HCl和0.009~0.027g的4‑二甲基氨基吡啶（DMAP）加入溶液中；在搅拌溶解后，用100~300μL的TEA调节溶液的pH值至7.2，得到溶液C，并室温反应2小时；同时将0.01~0.08g的1‑羟乙基‑2‑甲基‑5‑硝基咪唑（MN）溶解在1~6mL的DMSO中；然后，以0.1~10mL/min的速率将MN溶液逐滴加入溶液C中，得到溶液D，并在室温下避光反应24小时；再将反应溶液用截留分子量8000~14000Da的透析袋透析3天，以去掉未反应物；最后，冷冻干燥而得到MN改性的PEG‑PAA‑MN的白色粉末；c）将0.01~0.03g的PEG‑PAA‑MN，加入到通有