检测甘胆酸的试剂盒、方法及用途.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114428171A(43)申请公布日2022.05.03(21)申请号202011187058.3(22)申请日2020.10.29(71)申请人深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司地址518057广东省深圳市高新技术产业园区科技南十二路迈瑞大厦1-4层(72)发明人陈伟江明张裕平(74)专利代理机构北京派特恩知识产权代理有限公司11270代理人崔晓岚张颖玲(51)Int.Cl.G01N33/545(2006.01)G01N33/543(2006.01)G01N33/53(2006.01)权利要求书1页说明书11页(54)发明名称检测甘胆酸的试剂盒、方法及用途(57)摘要本发明涉及用于检测甘胆酸的试剂盒，包括：第一试剂，其含有甘胆酸与惰性载体的偶联复合物；和第二试剂，其含有包被有抗甘胆酸抗体的微粒；其中，所述试剂盒含有氨基酸，所述氨基酸选自精氨酸、赖氨酸和组氨酸中的一种或多种。通过添加氨基酸，本发明提高了甘胆酸检测的准确性和抗干扰能力。此外，还涉及检测甘胆酸的方法和氨基酸的抗干扰用途。CN114428171ACN114428171A权利要求书1/1页1.一种用于检测甘胆酸的试剂盒，包括：第一试剂，其含有甘胆酸与惰性载体的偶联复合物；和第二试剂，其含有包被有抗甘胆酸抗体的微粒；其中，所述试剂盒含有氨基酸，所述氨基酸选自精氨酸、赖氨酸和组氨酸中的一种或多种。2.权利要求1所述的试剂盒，其中，所述氨基酸存在于所述第一试剂或第二试剂中。3.权利要求1所述的试剂盒，其中，所述氨基酸的浓度被配制为使得在检测样本时其以14-130mM，优选以16-120mM，更优选以40-60mM的终浓度存在。4.一种用于检测甘胆酸的试剂盒，包括：第一试剂，其含有甘胆酸与惰性载体的偶联复合物；和第二试剂，其含有包被有抗甘胆酸抗体的微粒；其中，所述试剂盒含有一种或多种氨基酸，所述氨基酸的浓度被配制为使得在检测样本时其以14-130mM，优选以16-120mM，更优选以40-60mM的终浓度存在。5.权利要求4所述的试剂盒，其中，所述氨基酸为极性氨基酸，优选地，所述氨基酸为带正电极性氨基酸，例如，所述氨基酸选自精氨酸、赖氨酸和组氨酸。6.权利要求1-5中任一项所述的试剂盒，其中，所述试剂盒基于免疫比浊法检测甘胆酸。7.一种检测甘胆酸的方法，包括：加入样本、第一试剂和第二试剂，混匀并测定第一吸光度；一定时间后，测量第二吸光度；以及根据所述第一吸光度和第二吸光度计算甘胆酸浓度，其中，所述第一试剂含有甘胆酸与惰性载体的偶联复合物；所述第二试剂含有包被有抗甘胆酸抗体的微粒；并且所述第一试剂和/或第二试剂含有氨基酸，所述氨基酸选自精氨酸、赖氨酸和组氨酸中的一种或多种。8.权利要求7所述的方法，其中，所述氨基酸的浓度被配制为使得在所述混匀步骤后其以14-130mM，优选以16-120mM，更优选以40-60mM的终浓度存在。9.氨基酸在降低甘胆酸类似物对甘胆酸检测的干扰中的用途，其中，所述氨基酸选自精氨酸、赖氨酸和组氨酸中的一种或多种。10.权利要求9所述的用途，其中，所述氨基酸的浓度被配制为检测时的反应体系中，其以14-130mM，优选以16-120mM，更优选以40-60mM的浓度存在。2CN114428171A说明书1/11页检测甘胆酸的试剂盒、方法及用途技术领域[0001]本发明涉及甘胆酸检测领域，具体涉及基于免疫比浊法的甘胆酸检测。背景技术[0002]甘胆酸(Cholyglycine,CG)是一种结合型胆酸，其由胆酸和甘氨酸结合而成。[0003]在正常情况下，外周血中胆酸含量甚微，正常成人无论空腹或餐后，其血清甘胆酸浓度稳定在低水平。当肝脏细胞受损时，肝脏细胞摄取甘胆酸的能力下降，致使血液中甘胆酸含量增高；胆汁淤积是肝脏排泄胆酸所发生的障碍，由于返流血液循环的甘胆酸含量增高，故胆汁淤积也使血清甘胆酸含量增高。因此，可将血清甘胆酸水平与其他临床指标结合，对肝病以及胆汁淤积的发生、进展和预后进行辅助判断。[0004]甘胆酸检测的反应原理采用基于竞争抑制的胶乳增强免疫比浊法。在该方法中，血清中的甘胆酸与甘胆酸-蛋白偶联复合物竞争结合甘胶乳微粒表面包被的甘胆酸单克隆抗体。其中，人工设计的甘胆酸-蛋白偶联复合物有较多抗体结合位点，与胶乳微粒产生明显交联反应；而血清中甘胆酸抗原与抗体结合位点较少，表现为仅封闭微粒表面抗体，降低交联反应。据此，可通过对交联反应产生的吸光度的变化，来定量检测样本中血清甘胆酸抗原。[0005]然而，由于甘胆酸是胆酸的结合型胆酸之一，是胆汁酸的一种。而人体内胆汁酸还包括：甘氨熊脱氧胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、牛磺熊脱氧胆酸、牛磺鹅脱氧胆酸、牛磺脱氧胆酸、熊脱氧胆酸、