《生物实验设计（理论部分）》.docx

《生物实验设计（理论部分）》生物组织中还原糖、蛋白质的鉴定的实验设计珠海市斗门区第一中学赵洁弟一、实验目的1、初步掌握鉴定生物组织中还原糖、蛋白质的基本方法。2、如实观察并记录实验现象和结果提高学生的实验操作能力和观察能力。3、亲手实验激发学生对生物科学的学习兴趣。4、体会科学研究的乐趣培养学生刻苦钻研、一丝不苟的科学态度和实事求是的科学精神。二、实验设计（一）还原糖的鉴定1、实验原理斐林试剂只能检测生物组织中可溶性的还原糖存在与否而不能鉴定可溶性的非还原糖。斐林试剂是由质量浓度为0.1g／ml的NaOH溶液和质量浓度为0.05g／ml的CuSO4溶液配制而成两者混合后立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下能够生成砖红色的Cu2O而葡萄糖本身氧化成葡萄糖酸。斐林试剂很不稳定故应将斐林试剂的甲液（0.1g／ml的NaOH溶液）和乙液（0.05g／ml的CuSO4溶液）分别配置、储存、使用时临时配置。2、材料器具（1）实验材料：梨汁（2）仪器：试管架、试管夹、试管、滴管、酒精灯。（3）试剂：斐林试剂A液、斐林试剂B液。3、方法步骤（1）取两支已编号12的试管分别滴入1ml（约20滴）刚配置好的斐林试剂（分别加入0.5ml质量浓度为0.1g／ml的NaOH溶液和质量浓度为0.05g／ml的CuSO4溶液）。（2）向1号试管加入1ml的梨汁向2号试管加入1ml的自来水作对照。（3）用试管夹夹住试管直接放在酒精灯加热。4、实验结果与结论片刻即可看见1号试管里的溶液由蓝色变成砖红色证明梨汁含有还原糖；2号试管由蓝色变成黑褐色。5、讨论（1）植物组织是常用的实验材料但必须加以选择。最好不用植物的叶子作实验材料也不宜用单子叶植物的叶子作实验材料。（2）本实验最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织（或器官）而且组织的颜色较浅或近于白色。如苹果和梨通过比较发现梨的效果更好。梨汁液多挤汁操作很容易。还可用白色甘蓝叶和白萝卜。(二)、蛋白质的鉴定1、实验原理鉴定生物组织中是否含有蛋白质时常用双缩脲法使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g／mL的NaOH溶液和质量浓度为0.01g／mL的CuSO4溶液。在碱性溶液(NaOH)中双缩脲(H2NOCNHCONH2)能与Cu2+作用形成紫色或紫红色的络合物这个反应叫做双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键因此蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。2、材料器具（1）实验材料：蛋清稀释液（2）仪器：试管架、试管、滴管。（3）试剂：、双缩脲试剂A液、双缩脲试剂B液。3、方法步骤（1）取两支已编号12的试管向1号试管内注入蛋清稀释液1ml向2号试管内注入1mL的自来水作对照。（2）向12号试管中分别加入1mL双缩脲试剂A（质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液）摇荡均匀。注意观察试管内溶液的颜色有什么变化。（3）再向12号试管内分别加入3-4滴双缩脲试剂B（质量浓度为0.01g/ml的CuSO4溶液）摇荡均匀。4、实验结果与结论即可看见1号试管由蓝色变成紫色说明蛋清液中含有蛋白质；2号试管的蓝色不变。5、讨论（1）实验材料最好选用富含蛋白质的生物组织(或器官)植物材料常用的是大豆种子动物材料常用的是鸡蛋(卵白)。如用大豆种子必须提前浸泡1～2d这样容易研磨成浆。有条件的学校可以直接采用现成的大豆磨成的豆浆豆浆可以购买也可用小型的研磨机制取。利用豆浆作实验材料可以节约实验时间。（2）用蛋清做实验必须经过稀释如果稀释不够反应后的产物会凝固在试管壁上使反应不容易彻底并且试管也不容易刷洗干净。（3）双缩脲试剂A和双缩脲试剂B的加入顺序不可以改变。因为蛋白质只有在碱性环境中才能与硫酸铜发生紫色反应否则紫色反应会被氢氧化铜的颜色遮蔽。创意自评：利用新的操作方法来做实验能有效地降低实验成本、简化实验步骤缩短实验时间从而达到良好的实验效果。