消化道平滑肌生理特性及药物对平滑肌运动的影响.pdf

消化道平滑肌生理特性及药物对平滑肌运动的影响PhysiologicalCharacteristicsofGutSmoothMuscleandEffectsofDrugsontheMovementofSmoothMuscle【目的和原理】观察家兔离体胃肠平滑肌的电生理特性和一般特性；熟悉哺乳动物离体器官灌流的一种方法；观察不同浓度乙酰胆碱(acetylcholineACh)对家兔离体肠平滑肌的作用及阿托品(atropine)对ACh的拮抗作用；熟悉研究药物量效关系的实验方法。消化道平滑肌具有自动节律性较大的伸展性对化学物质、温度改变及牵张刺激较为敏感等一般生理特性。电位变化方面消化道平滑肌除了具有一般可兴奋组织的静息电位(RP)和动作电位(AP)还有其特有的慢波电位。ACh通过激动肠管平滑肌上的M型胆碱受体可引起肠管平滑肌收缩在一定剂量范围内其收缩强度呈剂量依赖性。Atropine作为M型胆碱受体阻断剂可竞争性地拮抗ACh对M受体的激动作用。【实验动物】家兔体重2.5～3.0Kg。【实验器材和药品】超级恒温器、恒温浴管、BL-410生物机能实验系统、木槌、万能支架台、双凹夹2个、温度计、烧杯、石蜡作底面的表面皿、玻璃微电极、Ag-AgCl电极丝、张力换能器、注射器(1.0ml)7支、注射针头、手术器械、蛙心夹、弹簧夹、兔手术台。台氏液、1：10000肾上腺素(adrenalineadr)、1NNaOH、1NHCl、不同浓度（3X10－1、3X10－3、3X10－5、3X10－7、3X10－9、3X10－11）mol/L氯化ACh。【实验步骤和观察项目】1.标本制作用木槌猛击家兔头枕部致昏迅速剖开腹腔找出胃与十二指肠交界处用线结扎将与十二指肠相连的肠系膜沿肠缘剪开在结扎线近胃侧剪断小肠立即取出长约20～30cm的肠管。把离体肠管置于4oC的台氏液中轻轻漂洗将肠内容物冲洗干净并将肠管剪成2～3cm数段再换台氏液备用。2.电生理特性观察：（1）灌制微电极：配置2NKCl溶液做为电极液拉制玻璃微电极充入电极液使微电极尖端无气泡电极电阻10～30MΩ。（2）轻取一段离体肠管标本放于盛有台氏液的表面皿中剪开肠管用小钢针将标本固定在石蜡底面上不要过分牵拉。表面皿中台氏液略高于标本表面约1mm。（3）将微电极安装到微电极操纵器上并将一根Ag-AgCl电极丝插入玻璃微电极内电极丝另一端连于微电极放大器“+”极输入端。微电极放大器的“-”极输入端接参考电极与表面皿中台氏液接通。（4）开机进入程序降下微电极使其尖端刺入平滑肌细胞内观察电位变化。3.一般特性观察：（1）记录肠管在室温（20℃）台氏液里的活动。（2）将台氏液温度逐渐升高至38oC记录肠管运动的变化。（3）待台氏液温度稳定于38oC后加AD（1：10000）1～2滴于浴管中观察肠管运动的变化。在观察到有明显效应后立刻用38oC台氏液冲洗3次使肠管活动恢复正常。（4）同法分别加入1NNaOH溶液1～2滴；1NHCl溶液1～2滴观察对肠管运动的影响。（5）用含Ca2+台氏液冲洗3次换入无Ca2+台氏液观察肠管运动变化。（6）将结果填入下表。家兔离体小肠平滑肌一般生理特性观察项目紧张性收缩频率收缩幅度室温台氏液38oC台氏液1：10000AD1NNaOH1NHCl38oC