最新食用菌污染原因分析.pdf

菌种生产杂菌污染的原因分析1．灭菌不彻底这一原因特点是导致的污染率高、发生早出现污染的部位不规则——培养基上中下均可出现杂菌菌落。这类污染常在接种培养3～5天后发生。一般杂菌的菌丝体与孢子经过高压121～1270C保持1．5～2．5h均能杀死。消毒不彻底引起的污染往往是由于没达到规定的温度与时间或者是高压灭菌时冷空气没放尽所致。另外装锅时摆放太紧密通气性不好灭菌锅发生漏气温度、压力达不到所需数值也可导致杂菌产生。2．培养料问题拌料时主料与辅料未充分拌匀；水分含量不足或培养料成团未散开吃水不透造成灭菌死角；或者培养料不新鲜本身带杂。3．母种带杂菌种本身不纯。无论是母种、原种还是栽培种都要使用纯种接种培养。如果用于繁殖扩大的菌种本身不纯那么制备的新菌种也必然受到污染。污染常常表现在接种菌块之中或周围呈小批量的规模如果此时不能及时发现危害将进一步加大。有时生产的一批菌种中。集中在一起的菌种都出现污染且都发生在接种块周围则说明菌种带杂。因此在生产母种时要经常检查对污染物及时清理防止扩大时进一步污染。4．接种污染这类污染的特点是杂菌菌落先从菌种块上长出．杂茵的种类一致通常成批量发生且出现早接种3-5天内就可肉眼鉴别。接种室或操作台消毒不彻底．接种时操作不严格将杂菌孢子带入瓶中这种污染常分散出现于菌种表面。如一支被污染的母种会造成扩接后的4—6瓶原种全部污染：一瓶被污染的原种(有时肉眼难以发现)造成扩大后的30～50瓶栽培种的污染。这类污染要靠严格检查菌种质量来克服不但使用前要认真检查．而且在培养全过程中要连续检查和观察．确保菌种纯度。5．接种操作污染这类污染一般发生在接种口处．较接种物带菌和灭菌不彻底造成的污染发生晚．一般接种后7d左右出现。其污染源主要是：接种室(箱)空气消毒不彻底；菌种瓶(袋)冷却时附在表面的杂菌；接种人员自身洁净度不良：违反接种操作规程等。操作不规范造成的菌种污染杂菌不仅在接种块周围还常出现在其他料面的表面呈花花点点状不一定集中一处且无规律。这些操作技术包括灭菌操作、灭菌后无菌处理、接种过程无菌操作、接种后的培养条件控制等。需注意以下技术环节：5．1不使棉塞打湿灭菌码放时．棉塞切勿贴触锅壁；灭菌结束后要自然冷却不可强制冷却；当冷却至一定程度后微开锅门．让锅内的余热把棉塞上的水气蒸发；灭菌时可同时灭菌一些棉塞留接种时换下打湿的棉塞。5．2洁净冷却灭菌后的菌种瓶(袋)不能直接放在有尘土的地面上冷却：冷却窒使用前可用紫外线灯和喷雾相结合进行空气消毒。5．3严格消毒接种室(箱)使用前须严格消毒；接种操作人员须在缓冲间穿戴专用衣帽(定期洗涤)；接种前要消毒双手。5．4科学操作接种前做好一切准备工作。一次接种不间断。一气呵成：接种过程要少搬动、少说话、小动作以减少空气震动和流动；接菌室(箱)内绝对无菌的只有酒精灯火焰周围很小的范围．接种操作应尽量在这个小区内完成；拔棉塞时不可用力直线上拔．而应旋转式缓劲拔出避免外界空气突然进入而带入杂菌；接种室(箱)每次的接种量不宜过大；接种时．接种工具一旦触碰了非无菌物品如种瓶外壁、操作台面等．不要再用来取种．须重新火焰灼烧灭菌。6．设备设施简陋引起灭茵后无菌状态的改变本来灭菌后的菌种瓶(袋)已达无菌状态．但灭菌后的冷却和接种环境达不到洁净无菌．生产设备和生产环节分散．又往往忽略场地的大环境卫生导致了污染。冷却过程中．随着料温的降低瓶(袋)内气压降低．杂菌孢子随其内外气压的动态平衡向瓶(袋)内移动、定植。瓶袋外附有较多的灰尘(附着杂菌孢子)。成为接种操作污染的污染源。这种类型接种后污染率较低．随着培养时间的延长．污染率逐渐增高。通常大量发生在接种10d以后．甚至培养基表面已长满