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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112274475A(43)申请公布日2021.01.29(21)申请号202011338658.5A61K8/9789(2017.01)(22)申请日2020.11.25A61K8/34(2006.01)A61Q19/02(2006.01)(71)申请人熊宇山地址210000江苏省南京市玄武区龙蟠路109号(72)发明人熊宇山(74)专利代理机构北京华际知识产权代理有限公司11676代理人王战(51)Int.Cl.A61K8/99(2017.01)A61K8/365(2006.01)A61K8/44(2006.01)A61K8/67(2006.01)A61K8/73(2006.01)权利要求书1页说明书7页(54)发明名称一种有效降低黑色素的人参补水液及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种有效降低黑色素的人参补水液及其制备方法,包括人参提取物、维生素、维生素、甘油、透明质酸、乙二醇、月桂酸乙酯、柠檬酸、EDTA二钠、香精、水。以冻干粉形式保存粉剂,不但可以保护EGF的稳定性,以可以保护维生素C的稳定性;液体状态下,柠檬酸和EDTA二钠可以保防止维生素C氧化。将EGF‑TAT基因转录到人参体内,TAT可以携带EGF透过细胞膜,直达细胞内部,解决了大分子EGF的皮肤渗透性的问题,能够有效降低皮肤细胞中黑色素和有色细胞的含量,减轻皮肤色素的沉着,即能在皮肤细胞水平上改善皮肤的色素状况,达到美白效果。利用转基因技术将EGF基因转入人参发状根中并进行扩增培养,获得大量人参发状根,同时获得了EGF,节省了购买EGF的高额费用。CN112274475ACN112274475A权利要求书1/1页1.一种有效降低黑色素的人参补水液,包括:人参提取物0.5-5份、维生素C5-10份、维生素E0.3-2、甘油1-5份、透明质酸1.8-4份、乙二醇0.5-3份、月桂酸乙酯0.4-1.8份、柠檬酸1-2份、EDTA二钠0.8-2.5份、香精0.1-0.8份、水50-200份。2.根据权利要求1所述的一种有效降低黑色素的人参补水液,其特征在于:所述人参提取物1份、维生素C8份、维生素E1.2、甘油3份、透明质酸3份、乙二醇1.8份、月桂酸乙酯1.2份、柠檬酸1.6份、EDTA二钠1.7份、香精0.3份、水100份。3.一种有效降低黑色素的人参补水液的制备方法,包括以下具体步骤:步骤一:人参提取物的制备:取人参发状根洗净,超微粉碎,加入纯净水搅拌均匀后静止2-4h,8000-12000rpm离心20-40min,取上清液得人参提取物;步骤二:将人参提取物冷冻干燥,制得人参EGF冻干粉,添加维生素C、维生素E混合均匀,制得冻干粉-粉剂;步骤二:将甘油、月桂酸乙酯、EDTA二钠混合后,边搅拌边加热至60-90℃,使其充分融化制得A相;步骤三:将乙二醇、透明质酸、柠檬酸、去离子水混合后,边搅拌边加热至80-100℃,使其充分融化制得B相;步骤四:将A相加入B相中,混合搅拌均匀,然后加入人参提取物、熊果苷、香精,充分搅拌混合均匀后冷却至室温,即得溶解剂-水剂;步骤五:使用前将粉剂与水剂摇晃混合均匀即可。4.根据权利要求3所述的一种有效降低黑色素的人参补水液的制备方法,其特征在于:所述人参提取物,提取自外植体发状根中,外植体可以为芽、根、茎、叶片、叶柄。5.根据权利要求4所述的一种有效降低黑色素的人参补水液的制备方法,其特征在于:所述外植体发状根,用发根农杆菌对人参外植体进行侵染;取芽为外植体,外植体龄为7-14D,超声波处理时间4s,预培养和共培养48-72h,侵染时间为5-10min。6.根据权利要求5所述的一种有效降低黑色素的人参补水液的制备方法,其特征在于:所述共培养培养基pH值为5-6.2,蔗糖浓度为3-6%,添加0.1mg/mL的NAA。7.根据权利要求6所述的一种有效降低黑色素的人参补水液的制备方法,其特征在于:所述发根农杆菌菌株为A4。8.根据权利要求7所述的一种有效降低黑色素的人参补水液的制备方法,其特征在于:所述发根农杆菌其Ri质粒含有EGF-TAT基因,通过PCR扩增EGF基因、TAT基因,经酶切后,连接到Ri质粒。9.根据权利要求8所述的一种有效降低黑色素的人参补水液的制备方法,其特征在于:所述人参发状根进行PCR检测:根据设计的一对EGF-TAT基因引物,电泳检测出现了与基因引物相同的条带,而未转化的人参外植体则没有扩增出条带,证明重组基因己经整合进毛状根的基因组中。10.根据权利要求9所述的一种有效降低黑色素的人参补水液的制备方法,其特征在于:所述人参发状根转接到液体培养基中扩大增殖培养:用MS液体培养基,蔗糖浓度为30g/L,添加0.5mg/LKT-1、0