一种果蔬中氟醚菌酰胺残留的LC-MS/MS测定方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN104655764A(43)申请公布日2015.05.27(21)申请号201510109519.8(22)申请日2015.03.12(71)申请人崔淑华地址266002山东省青岛市市南区瞿塘峡路70号(72)发明人崔淑华马惠刘润珠(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)权利要求书2页说明书6页附图1页(54)发明名称一种果蔬中氟醚菌酰胺残留的LC-MS/MS测定方法(57)摘要本发明公开了一种果蔬中氟醚菌酰胺残留的LC-MS/MS测定方法，用乙腈或含1%乙酸的乙腈溶液均质提取样品中残留的氟醚菌酰胺，提取液经乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）和十八烷基硅烷键合相（C18）基质分散净化后，液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）检测，采用不含待测农药的空白基质溶液建立校正的标准曲线，外标法定量。本方法平均回收率为92.0%～96.2%，平均相对标准偏差（RSD）为4.0%～5.5%，检出限低于0.16μg/kg，具有操作简便、快速、灵敏度高、重复性好、定性定量准确的优点。能满足0.01mg/kg残留限量的“一律标准”技术要求，为保障我国人民食品安全、对外出口贸易健康发展提供有力的技术支撑。CN104655764ACN104655764A权利要求书1/2页1.一种果蔬中氟醚菌酰胺残留的LC-MS/MS测定方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)提取称取蔬菜和水果样品于具塞离心管中，加入乙腈或含1％乙酸的乙腈溶液均质提取1min，加入氯化钠或乙酸钠中的一种和无水硫酸镁振荡后离心；(2)净化移取样品提取液上清液于离心管中，加入基质分散固相萃取剂，涡旋振荡离心，过膜后，待液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测；(3)标准工作溶液的配制将不含氟醚菌酰胺的同种类基质空白样品按上述步骤(1)、(2)处理，得样品提取净化液，用空白提取净化液配制成至少5个浓度的氟醚菌酰胺系列混合标准工作液；(4)测定和结果计算将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液进行LC-MS/MS测定，以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到基质标准工作曲线；在相同条件下将步骤(2)中净化后的样品液注入LC-MS/MS进行测定，测得样品液中氟醚菌酰胺的色谱峰面积，代入基质标准曲线，得到样品液中氟醚菌酰胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中氟醚菌酰胺残留量。2.根据权利要求1所述的一种果蔬中氟醚菌酰胺残留的LC-MS/MS测定方法，其特征在于，步骤(1)中蔬菜和水果样品若为脱水样品，需降低称样量，并加适量水充分浸润。3.根据权利要求1所述的一种果蔬中氟醚菌酰胺残留的LC-MS/MS测定方法，其特征在于，步骤(1)中采用乙腈提取时需加入氯化钠盐析，采用含1％乙酸的乙腈溶液提取时需加入乙酸钠盐析。4.根据权利要求1所述的一种果蔬中氟醚菌酰胺残留的LC-MS/MS测定方法，其特征在于，步骤(2)中基质分散固相萃取剂由无水硫酸镁、C18和PSA组成，每体积提取液中无水硫酸镁、C18和PSA加入量分别为150mg、50mg和25mg。5.根据权利要求1所述的一种果蔬中氟醚菌酰胺残留的LC-MS/MS测定方法，其特征在于，步骤(4)中LC-MS/MS的液相色谱分析条件为：填料为C18的色谱柱，柱温为30℃；进样体积为5μL；流动相为：含5mmol/L乙酸铵的水溶液和乙腈，梯度洗脱；梯度洗脱程序为：时间(min)5mmol/L乙酸铵的水溶液(％)乙腈(％)080-982-200.580-982-202.02-1090-985.02-1090-985.280-982-208.080-982-202CN104655764A权利要求书2/2页质谱条件为：电喷雾质谱检测；电喷雾电压为-3500至-4500V；雾化气压力为275.9kPa；干燥气和鞘气均为氮气；干燥气温度为300℃；干燥气流速为5.0L/min；鞘气温度为250℃，鞘气流速为11.0L/min，喷嘴电压500V；多反应监测(MRM)负离子扫描模式；氟醚菌酰胺的母离子为414.4～415.4，子离子分别为163.3～164.3和178.4～179.4。3CN104655764A说明书1/6页一种果蔬中氟醚菌酰胺残留的LC-MS/MS测定方法技术领域[0001]本发明涉及一种果蔬中氟醚菌酰胺残留的LC-MS/MS测定方法，更具体地说是采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)定性定量测定蔬菜和水果中残留的氟醚菌酰胺含量的方法，属于农药残留量的测定技术领域。背景技术[0002]氟醚菌酰胺(LH-2010A)是山东省联合农药工业有限公司于2010年创新合成的一种新型含氟苯甲酰胺类杀菌剂，化学名称为：N-(3-氯-5-(三氟