进出口食品菌落总数检测的注意事项.docx

进出口食品菌落总数检测的注意事项摘要总结了进出口食品菌落总数检测的注意事项包括环境条件、工具器皿、培养基、样品处理、样品稀释与平板接种、菌落培养与菌落计数等内容以供参考。关键词菌落总数；检测；进出口食品；注意事项中图分类号TS207.4文献标识码B文章编号1007-5739（2014）03-0295-01菌落总数是指食品检样经过处理在一定条件下（如需氧性质、培养基成分、pH值、培养温度和时间等）1mL（g）检样中所含菌落的总数。菌落总数反映出食品的新鲜程度反映出食品生产过程中食品是否变质和食品生产的一般卫生状况等它是判断食品卫生质量的重要依据。因此在进口食品中各国常把菌落总数作为食品卫生质量的重要依据以此守护国门保障国人的食品安全。同时出口贸易公司也在努力使自己的产品质量合格以便出口。作为进出口产品的质量把关部门其作用显得格外重要。在进出口食品中因菌落总数超标而被销毁或禁止进出口的食品比例很大。鉴于食品中影响菌落总数检测结果的因素的多样性及微生物检验项目的不可复检性[1]菌落总数检测显得尤为重要现就进出口食品中菌落总数检测中应注意的若干问题总结如下。1环境条件菌落总数的检测需在无菌室（或超净工作台）内进行。在无菌室内工作人员所用的实验服、口罩、鞋、帽等必须是灭菌的或是一次性无菌用品。质量体系中应有无菌室进出登记与卫生控制程序以保证无菌室的洁净状态。无菌室内不得存放与工作无关的物品。每次实验前无菌室都要经紫外线照射灭菌20min左右。灭菌后至工作前任何人不得进入无菌室工作人员在实验完成前也不得随意出入无菌室。应定时对无菌室内紫外灯紫外线照射的效果（紫外灯监测卡）进行监测如不合格应及时更换紫外灯。无菌室（或超净工作台）应有落菌实验的监测与记录一般每10d监测1次超净工作台应达100级无菌室应达到10000级。2工具器皿菌落总数检测时所用的工具和器皿如勺子、剪刀、镊子、吸管、试管等使用之前应进行认真清洗不得残留抑菌物质放置在铝盒、不锈钢吸管消毒桶或用牛皮纸包装好进行干燥和灭菌处理于121℃湿热灭菌20min于160～170℃干热灭菌2h不能用消毒剂消毒以防抑菌。勺子的柄应长点大小适宜方便取样防止污染样品；灭菌前吸管上端要棉花塞住顶部防止污染样品。菌落总数检测时所用均质袋一次性平皿（玻璃平皿）都应进行验收。总之工具器皿都要做到无菌状态。3培养基按照GB4789.2-2010的规定食品中菌落总数检测时使用的培养基为平板计数琼脂可以从专业公司买到如经过ISO9001体系认证或满足相应的资质证明的公司。向新的公司购买或购置新的批号的培养基时一定要用菌株（如大肠埃希氏菌ATCC25922）做培养基的验证试验确保该批培养基是合格的。干粉培养基应放在低温干燥的环境中保存房间应通风透气避免日光直晒。制备平板计数琼脂时应在三角烧瓶中进行称量培养基时应用牛角勺避免用铁勺因其会对微生物生长有毒害作用培养基配制要用纯净水或蒸馏水；待干粉培养基完全溶解后才分装；培养基的pH值经水溶解和高压灭菌后pH值都可能会有所变化因此要调整培养基配制时与高压灭菌后的pH值以便符合细菌生长的最佳酸碱度。经121℃高压灭菌15min的好的平板计数琼脂可以保温在46℃的水浴箱内备用但时间不宜超过4h[2]时间过久瓶底会出现凝块。未使用完的平板计数琼脂可置于室温保存确认未被污染时可以继续使用使用前煮沸即可但只能煮沸1次不可多次重复使用。4样品处理处理菌落总数检测的样品时一定要始终保持无菌状态。实验前要用70%～75%酒精棉球擦拭消毒双手戴医用无菌无粉手套。打开样品包装前在取样开口处的周围表面用70%～75%酒精棉球擦拭消毒防止污染样品。如瓶装葡萄酒打开时消毒瓶口倒取样品时应先摇匀经瓶口弃去50～100mL然后再接取检验用样品。对于偏酸性样品（如食醋）可用灭菌的20%～30%碳酸钠溶液调至中性再进行稀释检验而对含盐量较高的样品（如酱油）不应用生理盐水进行稀释可用灭菌蒸馏水或纯净水进行稀释否则会使不适合酸性状态下生长的细菌或不适于高盐状态下生长的细菌受抑制往往会使结果比实测值偏低。5样品稀释与平板接种因细菌每分裂繁殖1次的时间为20min左右所以样品从稀释、平板接种至倾注平板计数琼脂结束应在20min内完成否则结果会偏高。平板计数琼脂其温度应保证在（46±1）℃温度过高或过低都会影响结果。倾注平板计数琼脂后立即在水平桌面上推旋培养皿可以左右交叉推旋数下使检样、稀释液与培养琼脂混合均匀。样品在稀释时常会碰到一些较难溶解的情况（如糖果）不宜用均质袋处理用均质