海带多糖的复合酶提取方法及得到的海带多糖.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106883309A(43)申请公布日2017.06.23(21)申请号201710240346.2(22)申请日2017.04.13(71)申请人烟台大学地址264005山东省烟台市清泉路30号(72)发明人付学军孙力赵明日王鸷丁宁(74)专利代理机构天津市鼎和专利商标代理有限公司12101代理人李凤(51)Int.Cl.C08B37/00(2006.01)权利要求书1页说明书6页(54)发明名称海带多糖的复合酶提取方法及得到的海带多糖(57)摘要本发明公开了一种海带多糖的复合酶提取方法及得到的海带多糖，以海带加工下脚料为原料，先烘干粉碎，取适量海带粉,加入全自动水解反应器，按料液比1：35-45ml加入pH6.0缓冲液,搅匀后加入复合酶,按海带粉质量为1g计，纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和蛋白酶的加入量分别为0.004-0.006g，0.006-0.008g，0.004-0.006g，0.01-0.014g；调节pH值为5.5-6.5，45-55℃，酶解3-4h,升温灭酶，取出水解液，抽滤除去沉淀及不溶物，向上清液加入乙醇至体系乙醇体积分数为65-75％，于4℃冰箱冷藏，过夜。3000g-4000g/min离心20min,将沉淀物经冷冻干燥，即得海带粗多糖。本发明能在温和条件下有效地提高了多糖得率，纯度，完整保留多糖结构和生物活性，过程中不会产生有毒物质及对环境产生污染。CN106883309ACN106883309A权利要求书1/1页1.一种海带多糖的复合酶提取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)以海带加工下脚料为原料，先烘干、粉碎，取海带粉,加入全自动水解反应器，按料液比1g：35-45ml加入0.1mol/L,pH6.0的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,搅匀后加入复合酶，复合酶由纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和蛋白酶组成，按海带粉质量为1g计，纤维素酶的加入量为0.004-0.006g、半纤维素酶0.006-0.008g、果胶酶0.004-0.006g和蛋白酶0.01-0.014g；(2)调节pH值为5.5-6.5，45-55℃，酶解3-4h,升温灭酶，取出水解液，抽滤除去沉淀及不溶物；(3)向上清液加入乙醇至体系乙醇体积分数为65％-75％，于4℃冰箱冷藏，过夜，3000g-4000g/min离心20min,将沉淀物经冷冻干燥，即得海带粗多糖；(4)将粗多糖配成质量比浓度为25％-35％的水溶液，加入乙醇至体系乙醇体积分数为60％-80％,重复沉淀三次得精制海带多糖。2.根据权利要求1所述的海带多糖的复合酶提取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)以海带加工下脚料为原料，先烘干、粉碎，取海带粉,加入全自动水解反应器，按料液比1g：40ml加入0.1mol/L，pH6.0的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,搅匀后加入复合酶，复合酶由纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和蛋白酶组成，按海带粉质量为1g计，纤维素酶的加入量为0.005g、半纤维素酶0.007g、果胶酶0.005g和蛋白酶0.012g；(2)调节pH值为6.0，50℃，酶解3.5h,升温灭酶，取出水解液，抽滤除去沉淀及不溶物；(3)向上清液加入乙醇至体系乙醇体积分数为65％，于4℃冰箱冷藏，过夜，3500g/min离心25min,将沉淀物经冷冻干燥，即得海带粗多糖；(4)将粗多糖配成质量比浓度为30％的水溶液，加入乙醇至体系乙醇体积分数为70％,重复沉淀三次得精制海带多糖。3.根据权利要求1所述的海带多糖的复合酶提取方法，其特征在于，所述纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和蛋白酶为帝斯曼公司生产的纤维素酶ValidaseTRL，半纤维素酶BakezymeHSP6000BG、果胶酶Klzrzyme150、蛋白酶ValidaseFPConcentrate。4.如权利要求1-3任一项所述的海带多糖的复合酶提取方法制得的海带多糖。2CN106883309A说明书1/6页海带多糖的复合酶提取方法及得到的海带多糖技术领域[0001]本发明涉及海带多糖及其提取方法，具体说，是一种海带多糖的复合酶提取方法及得到的海带多糖。背景技术[0002]我国的海带产量位居世界首位。目前，海带加工业以粗加工为主；褐藻工业以生产褐藻酸钠、甘露醇及碘为主。褐藻工业及海带粗加工时产生大量残渣废液及下脚料等，褐藻糖胶和海藻蛋白以及膳食纤维等存在于其中，不但污染环境浪费资源而且也是一种巨大的浪费。大量研究发现海带多糖具有抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、抗凝血、降血压等多种生理活性，提高机体的免疫力。要找出一种能够用于工业化生产的高效提取海带中的海带多糖的方法,为褐藻资源的高效利用开辟一种新的途径，为褐藻工业的高值化开发利用建立一个完善的技术平台，更好地开发海