循环肿瘤细胞分离富集微流控芯片及其富集方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107402303A(43)申请公布日2017.11.28(21)申请号201610344919.1(22)申请日2016.05.20(71)申请人益善生物技术股份有限公司地址510663广东省广州市广州科学城揽月路80号广州科技创新基地B、C区五层(72)发明人刘志明吴诗扬廖传荣(74)专利代理机构广州华进联合专利商标代理有限公司44224代理人万志香(51)Int.Cl.G01N33/574(2006.01)权利要求书1页说明书12页附图2页(54)发明名称循环肿瘤细胞分离富集微流控芯片及其富集方法(57)摘要本发明公开了一种循环肿瘤细胞分离富集微流控芯片及其富集方法。循环肿瘤细胞分离富集微流控芯片包括样品处理室以及分离纯化室。分离纯化室具有微通道、磁场吸附件、磁性收集腔室、细胞收集腔室以及滤膜。微通道内具有子通道，磁场吸附件设在子通道的内壁上；微通道的一端连通于样品处理室，另一端依次连通于磁性收集腔室以及细胞收集腔室，磁性收集腔室用于收集未被子通道的内壁吸附的磁珠，细胞收集腔室内设有能够截留循环肿瘤细胞的滤膜，细胞收集腔室还具有用于供滤膜过滤后的液体流出的出液口。该循环肿瘤细胞分离富集微流控芯片高效、快速、特异性好和准确度高。CN107402303ACN107402303A权利要求书1/1页1.一种循环肿瘤细胞分离富集微流控芯片，其特征在于，包括：样品处理室；以及分离纯化室，所述分离纯化室具有微通道、磁场吸附件、磁性收集腔室、细胞收集腔室以及滤膜，所述磁场吸附件设在所述微通道的内壁上；所述微通道的一端连通于所述样品处理室，另一端依次连通于所述磁性收集腔室以及所述细胞收集腔室，所述磁性收集腔室用于收集未被所述子通道的内壁吸附的所述磁珠，所述细胞收集腔室内设有能够截留循环肿瘤细胞的所述滤膜，所述细胞收集腔室还具有用于供所述滤膜过滤后的液体流出的出液口。2.根据权利要求1所述的循环肿瘤细胞分离富集微流控芯片，其特征在于，所述样品处理室具有进样口。3.根据权利要求1所述的循环肿瘤细胞分离富集微流控芯片，其特征在于，所述样品处理室内还具有微管道，所述样品处理室通过所述微管道连通于所述微通道。4.根据权利要求3所述的循环肿瘤细胞分离富集微流控芯片，其特征在于，所述样品处理装置还具有控制阀，所述控制阀设在所述微管道上以用于打开或者关闭所述微管道。5.根据权利要求1-4任意一项所述的循环肿瘤细胞分离富集微流控芯片，其特征在于，所述微通道中包含有1-10个平行排布的所述子通道。6.根据权利要求5所述的循环肿瘤细胞分离富集微流控芯片，其特征在于，所述子通道的宽度为50-200μm，长度为50-100mm，所述子通道的高度为50-100μm。7.一种循环肿瘤细胞分离富集方法，其特征在于，包括如下步骤：将样品、红细胞裂解液以及包埋有抗体的磁珠加入样品处理室中，通过所述红细胞裂解液去除样品中的红细胞，所述磁珠上的所述抗体与所述样品中的白细胞进行杂交；经过处理后的所述样品进入微通道的子通道中，所述子通道内壁上的磁场吸附件吸附连接有所述白细胞的所述磁珠，未被所述子通道内壁吸附的所述磁珠经过所述微通道进入磁性收集腔室内，目标循环肿瘤细胞依次通过所述子通道、所述磁性收集腔室后进入细胞收集腔室内，并截留在所述细胞收集腔室内的滤膜上，裂解后的废液依次通过所述微通道、所述磁性收集腔室以及所述滤膜后通过出液口流出。8.根据权利要求7所述的循环肿瘤细胞分离富集方法，其特征在于，经所述样品处理器处理后的所述样品以0.5-4mL/h的流速进入所述子通道中。9.根据权利要求8所述的循环肿瘤细胞分离富集方法，其特征在于，经所述样品处理器处理后的所述样品以2mL/h的流速进入所述子通道中。10.根据权利要求7所述的循环肿瘤细胞分离富集方法，其特征在于，所述样品与包埋有抗体的所述磁珠的用量比为5mL所述样品：500μL所述磁珠。2CN107402303A说明书1/12页循环肿瘤细胞分离富集微流控芯片及其富集方法技术领域[0001]本发明涉及生物医学领域，特别是涉及一种循环肿瘤细胞分离富集微流控芯片及其富集方法。背景技术[0002]循环肿瘤细胞(circulatingtumorcells,CTCs)于1869年首次被发现，它来源于原发肿瘤或转移肿瘤，获得脱离基底膜的能力并通过入侵组织基质进入血管，是存在于外周血中的各类肿瘤细胞的统称。目前肿瘤转移理论认为，CTC的形成是肿瘤远处转移的标志。循环肿瘤细胞在人体血细胞中的含量很少，1mL血中仅含有约1-10个CTC。因此，对其检测和计数方法必须高效、快速、特异性好、灵敏度和精确度高。目前CTC分离富集方法主要分为非特异性富集方法和特异性富集方法。非特异性的