石斛多糖提取工艺的研究.docx

石斛多糖提取工艺的研究[摘要]目的:对石斛多糖提取工艺进行优化。方法:比较不同浸提温度、时间和除蛋白方法对多糖得率的影响优化工艺。结果:石斛多糖最佳提取工艺条件为90℃水浸提3～4h料水体积比为1∶50采用Sevag法脱蛋白样品-Sevag溶液=1∶1、氯仿-正丁醇=10∶2.5提取时间为30min。结论:此方法提取石斛多糖得率高为理想的提取条件。[关键词]石斛;多糖;提取工艺[中图分类号]R284.2[文献标识码]A[文章编号]1673-7210(2010)04(c)-040-03ExtractiontechnologyofpolysaccharideinDendrobiumCHENRui(MedicalPromotionProfessionGuangzhouVocationalCollegeofScienceandTechnologyGuangzhou510550China)[Abstract]Objective:Tostudyoptimumextracted-conditionsofpolysaccharideinDenderobiun.Methods:Themostyieldofpolysaccharidewasgottenwhichvolumeratioofdendrobiumtowaterdistillingtemperaturetheandmethodofisolatingproteinwereused.Results:Theeffectswasbestwhenvolumeratioofdendrobiumtowaterwas1∶50distillingat90℃for3-4hoursisolatingproteinbysevegmethodinthemixturecomposedof50%sampleand50%sevagsolutiontheratioofchloroformandn-butanowas10∶2.5theextractiontechnologywas30min.Conclusion:Theextractionmethodisperfectbecausethemostyieldofpolysacchareideisgotten.[Keywords]Dendrobium;Polysaccharide;Extractiontechnology石斛属植物具有很高的药用价值。而多糖类成分是石斛中具有免疫增强作用[1]和抗肿瘤作用[2]的活性成分常以多糖的含量高低来判断石斛药材质量的高低。本研究对石斛多糖的提取工艺进行优化探讨为其工业化生产和利用提供理论基础。1仪器与试药1.1仪器仪器设备有ESJ120-4型万分之一天平电热恒温水浴锅RE-52A型旋转蒸发器755B型紫外可见分光光度计。1.2试药石斛(四川乐山市歇马乡经成都中医药大学严铸云教授鉴定为细茎石斛)洗净杀青后于60℃烘干粉碎过50目筛备用。本实验所用试剂均为分析纯。2方法与结果2.1提取工艺[3-5]取石斛粗粉约50g加入石油醚(60～90℃)250ml回流提取1h脱脂过滤挥干溶剂加入80%乙醇250ml回流提取1h过滤挥干溶剂加入蒸馏水浸提2次趁热过滤减压浓缩至150ml0.1%活性炭脱色过滤脱蛋白加入95%乙醇使溶液含醇为80%于冰箱中静置过夜沉淀物用无水乙醇、丙酮、乙醚依次洗涤烘干得石斛多糖粗制品。2.2加水量的选择原料与水体积比分别为1∶20、1∶30、1∶40、1∶50、1∶60比较其多糖得率。2.3浸提温度的选择分别在80、85、90、100℃条件下浸提3～4h比较其多糖得率。2.4蛋白去除方法的选择本实验运用Sevag法、TCA法[5-6]去除石斛多糖中的蛋白质。2.4.1Sevag法多糖提取液真空抽滤浓缩至一定体积按比例加入氯仿-正丁醇混合液剧烈振荡以5000r/min的转速离心15min取上清液。如此反复操作3次。为取得最佳的实验效果对提取条件设计了正交试验[7]因素水平见表1。表1Sevag法脱蛋白正交设计Tab.1Factorsandtheirleve