一种青蒿重离子束辐照育种方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108668889A(43)申请公布日2018.10.19(21)申请号201810409666.0(22)申请日2018.05.02(71)申请人中国科学院近代物理研究所地址730000甘肃省兰州市城关区南昌路509号(72)发明人李雪虎梁剑平陆锡宏辛志君周翔张梅彭学东(74)专利代理机构兰州中科华西专利代理有限公司62002代理人李艳华(51)Int.Cl.A01H1/06(2006.01)C12Q1/6895(2018.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种青蒿重离子束辐照育种方法(57)摘要本发明涉及一种青蒿重离子束辐照育种方法，该方法包括以下步骤：⑴引进湖南永州的优质种子在河南禹州市田间种植，结合产量、抗病性、抗寒性和青蒿素含量进行筛选留种；⑵采用重离子束对步骤⑴所得的青蒿种子进行辐照诱变，得到辐照种子；同时以未辐照的步骤⑴所得的青蒿种子为对照；⑶将辐照种子种植于田间，形成第一代群体；同时以未辐照的青蒿种子为对照，选择变异单株，并确定最佳辐照剂量；⑷选择有益突变类型，筛选优良变异株系；⑸对优良突变品系的产量、品质、抗性进行鉴定试验，SRAP分子标记观察检测遗传稳定性，表现稳定的品系进行省级区域生产试验和品质检测，之后进行品种技术鉴定，申报新品种。本发明有效提高了育种效率。CN108668889ACN108668889A权利要求书1/1页1.一种青蒿重离子束辐照育种方法，包括以下步骤：⑴引进湖南永州的优质种子在河南禹州市田间种植，结合产量、抗病性、抗寒性和青蒿素含量进行筛选留种；⑵采用能量为80~120MeV/u、传能线密度LET=28.12keV/μm的重离子束，以照射剂量为10~80Gy、剂量率为2~10Gy/min对所述步骤⑴所得的青蒿种子进行辐照诱变，得到辐照种子；同时以未辐照的所述步骤⑴所得的青蒿种子为对照；⑶按株距80cm、行距80cm将所述辐照种子种植于田间，形成第一代群体；同时以所述未辐照的青蒿种子为对照，以株高、叶长、叶宽、茎粗、地上生物量、青蒿素含量为指标选择变异单株，精选320个变异单株，并确定15~60Gy为最佳辐照剂量；⑷选择有益突变类型，筛选优良变异株系：将所述步骤⑶所得的变异单株中获得的突变体种子继续种植，从第二代单株收获留种，选择目标位生物产量大、种子产量好、抗性强、青蒿素量高的有益性状；然后连续留种选育至三代；⑸对优良突变品系的产量、品质、抗性进行鉴定试验，SRAP分子标记观察检测遗传稳定性，表现稳定的品系进行省级区域生产试验和品质检测，之后进行品种技术鉴定，申报新品种。2.如权利要求1所述的一种青蒿重离子束辐照育种方法，其特征在于：所述步骤⑴中的重离子束种类为20Ne10+、12C6+、16O8+中的一种。2CN108668889A说明书1/4页一种青蒿重离子束辐照育种方法技术领域[0001]本发明涉及中草药生物技术育种领域，尤其涉及一种青蒿重离子束辐照育种方法。背景技术[0002]青蒿(别名：黄花蒿，拉丁名：ArtemisiaannuaL.)系世界广布种，但其青蒿素的含量随产地不同差异极大。除我国广西、重庆、湖南等少数南方地区外，世界绝大多数地区生长的青蒿中的青蒿素含量都很低(1%或以下)。据报道，每提高青蒿中1个百分点青蒿素含量在工业上将降低60%~70%的成本。因此，筛选高含量的种质资源是提高药源质量、降低制药成本的重要途径，是青蒿育种的物质基础。[0003]种质资源创新大多以常规方法为主，周期长、效率低，且创造的变异类型十分有限。重离子辐射诱变育种，以及与其它技术相结合的方法选育作物品种成为重要的育种手段，它的突出特点是打破基因连锁，造成细胞核中DNA分子双链断裂比例显著增加,表现出损伤程度比较严重、突变率高而且损伤不易修复，突变体稳定，在选育抗病、高产、提高青蒿素含量等农艺性状方面具有独到之处。发明内容[0004]本发明所要解决的技术问题是提供一种效率高的青蒿重离子束辐照育种方法。[0005]为解决上述问题，本发明所述的一种青蒿重离子束辐照育种方法，包括以下步骤：⑴引进湖南永州的优质种子在河南禹州市田间种植，结合产量、抗病性、抗寒性和青蒿素含量进行筛选留种；⑵采用能量为80~120MeV/u、传能线密度LET=28.12keV/μm的重离子束，以照射剂量为10~80Gy、剂量率为2~10Gy/min对所述步骤⑴所得的青蒿种子进行辐照诱变，得到辐照种子；同时以未辐照的所述步骤⑴所得的青蒿种子为对照；⑶按株距80cm、行距80cm将所述辐照种子种植于田间，形成第一代群体；同时以所述未辐照的青蒿种子为对照，以株高、叶长、叶宽、茎粗、地上生物量、青蒿素含量为指标选择变异单株，精选320个变异单