一种复方罗汉果清肺制剂的HPLC特征图谱及其构建方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109270201A(43)申请公布日2019.01.25(21)申请号201811177816.6(22)申请日2018.10.10(71)申请人桂林三金药业股份有限公司地址541004广西壮族自治区桂林市金星路1号(72)发明人邹节明周艳林(74)专利代理机构北京元中知识产权代理有限责任公司11223代理人另婧(51)Int.Cl.G01N30/88(2006.01)权利要求书2页说明书9页附图2页(54)发明名称一种复方罗汉果清肺制剂的HPLC特征图谱及其构建方法(57)摘要本发明属于药物成份鉴别和质量检测技术领域，具体地说，涉及一种复方罗汉果清肺制剂的HPLC特征图谱及其构建方法。所述的HPLC特征图谱包括10个特征峰，其中以4号峰木犀草苷为对照峰，其它9个特征峰的相对保留时间为：1号峰0.4345，2号峰0.4631，3号峰0.9312，5号峰1.2985，6号峰1.3391，7号峰1.4585，8号峰1.6630，9号峰1.9871，10号峰2.2534，各共有峰相对保留时间的RSD在0.09％～0.79％之间，均小于3.0％。本发明的有益效果为本发明首次建立了以处方药材特征性成分为基础的特征图谱，为复方罗汉果清肺制剂的质量标准的提升奠定基础。CN109270201ACN109270201A权利要求书1/2页1.一种复方罗汉果清肺制剂的HPLC特征图谱，其特征在于，所述的HPLC特征图谱包括10个特征峰，其中以4号峰木犀草苷为对照峰，其它9个特征峰的相对保留时间为：1号峰0.4345，2号峰0.4631，3号峰0.9312，5号峰1.2985，6号峰1.3391，7号峰1.4585，8号峰1.6630，9号峰1.9871，10号峰2.2534。2.根据权利要求1所述的HPLC特征图谱，其特征在于，10个特征峰的归属为：1号峰来自苦杏仁，2、8号峰来自罗汉果，3、4、5、6、7、9、10号峰来自菊花。3.一种复方罗汉果清肺制剂的质量检测方法，其特征在于，所述的质量检测方法包括将待检测复方罗汉果清肺制剂的HPLC特征图谱与权利要求1或2所述的复方罗汉果清肺制剂的HPLC特征图谱进行比较。4.根据权利要求3所述的质量检测方法，其特征在于，所述的质量检测方法包括如下步骤：1)使用HPLC法得到待检测复方罗汉果清肺制剂的HPLC特征图谱，并使用木犀草苷为对照峰，计算各色谱峰的相对保留时间；2)将步骤1)得到的相对保留时间与权利要求1或2所述的复方罗汉果清肺制剂的HPLC特征图谱中特征峰相对保留时间进行比较；3)根据步骤2)的比较结果判断所述待检测复方罗汉果清肺制剂的质量是否符合标准；优选地，3)中，根据步骤2)的比较结果判断所述待检测复方罗汉果清肺制剂中是否同时包含权利要求1中的10个特征峰，如果是，则符合标准，如果否，则不符合标准。5.一种如权利要求1或2所述的HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述的HPLC特征图谱的构建方法包括如下步骤：(1)制备对照品溶液：称取苦杏仁苷对照品、木犀草苷对照品、罗汉果皂苷V对照品加甲醇溶解，制成每1ml含苦杏仁苷30μg、木犀草苷10μg、罗汉果皂苷V40μg的混合对照品溶液；(2)制备供试品溶液：取复方罗汉果清肺制剂样品，加水溶解或加碱溶液调pH至中性，采用层析柱分离技术，依次采用水、稀乙醇洗脱，弃去洗脱液，再用体积分数为70％的乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干得到残渣，加甲醇溶解残渣，转移至量瓶中，定容至刻度，摇匀，即得；(3)色谱条件：采用WatersSunfireC18液相色谱柱；以乙腈-磷酸水为流动相进行检测，流速：0.8mL/min；柱温：25℃；检测波长：210nm；进样量：10μL；(4)特征图谱构建：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得复方罗汉果清肺制剂的HPLC特征图谱。6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备中，调pH至中性所用的碱溶液为弱碱溶液；优选地，所用的弱碱溶液为氨水。7.根据权利要求5或6所述的构建方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备中，依次采用水、稀乙醇洗脱，弃去洗脱液，再用体积分数为70％的乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干得到残渣，加甲醇溶解残渣，转移至量瓶中，定容至刻度，摇匀，即得；优选地，取复方罗汉果清肺制剂样品，加水溶解或加碱溶液调pH至中性，精密量取5ml，加至大孔吸附树脂柱D101上，以水20mL洗脱，弃去水液，再用体积分数为30％的乙醇20ml洗脱，弃去洗脱液，继续用体积分数为70％的乙醇20mL洗脱，收集洗脱液；蒸干后，取蒸干得到2CN109270201A权利要求书2/2页残渣，加体积分数为80％甲醇溶解，转移至5