一种高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109937965A(43)申请公布日2019.06.28(21)申请号201910266986.X(22)申请日2019.04.03(71)申请人台州恩泽医疗中心（集团）地址317000浙江省台州市临海市西门街150号(72)发明人杨欢利诸溢扬陆文昊吴为玲李真法蔡娇娇陈辉波(74)专利代理机构台州市方信知识产权代理有限公司33263代理人孙圣贵(51)Int.Cl.A01K67/02(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图2页(54)发明名称一种高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法(57)摘要本发明涉及一种高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法，属于实验动物繁育技术领域。为了解决现有的体外受精囊胚形成率低的问题，提供一种高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法，包括选经产的ICR母鼠作为建系母鼠，使其与建系公鼠进行配对建系生产F1代小鼠，通过早期性别鉴定，选留母鼠作为回交用的F1代ICR母鼠；将F1代ICR母鼠与建系公鼠回交生产F2代小鼠，通过早期性别鉴定，选留母鼠作为回交用的F2代ICR母鼠；选留的F2代ICR母鼠与建系公鼠回交生产F3代小鼠，并在F3代小鼠中通过早期性别鉴定筛选出F3代雌鼠为高囊胚形成率的ICR小鼠。本发明能够有效克服体外2-细胞发育阻滞，提高囊胚形成率的效果。CN109937965ACN109937965A权利要求书1/1页1.一种高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：A、选取经产的ICR母鼠作为建系母鼠，使建系母鼠与选取的建系公鼠进行配对建系生产F1代小鼠，在F1代小鼠中通过早期性别鉴定，选留母鼠作为回交用的F1代ICR母鼠；B、将选留的F1代ICR母鼠与最初的建系公鼠回交生产F2代小鼠，并在F2代小鼠中通过早期性别鉴定，选留母鼠作为回交用的F2代ICR母鼠；C、将选留的F2代ICR母鼠与最初的建系公鼠回交生产F3代小鼠，并在F3代小鼠中通过早期性别鉴定筛选出F3代母鼠为高囊胚形成率的ICR小鼠。2.根据权利要求1所述高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法，其特征在于，步骤A中所述经产的ICR母鼠选用产仔数≥10只且为10-15周龄的ICR母鼠。3.根据权利要求1所述高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法，其特征在于，步骤A中所述建系公鼠的见栓率达到80％以上。4.根据权利要求1-3任意一项所述高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法，其特征在于，步骤A中在对通过早期性别鉴定的母鼠到4-6周龄时进行繁殖性能鉴定，选留高繁殖能力的F1代ICR母鼠；步骤B中在对通过早期性别鉴定的母鼠到4-6周龄时进行繁殖性能鉴定，选留高繁殖能力的F2代ICR母鼠。5.根据权利要求1-3任意一项所述高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法，其特征在于，步骤B中所述回交时采用建系公鼠与F1代ICR母鼠的合笼比例为1：2-3；步骤C中所述回交时采用建系公鼠与F2代ICR母鼠的合笼比例为1：2-3。6.根据权利要求1-3任意一项所述高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法，其特征在于，步骤A中所述建系公鼠的周龄为8周龄。7.根据权利要求1-3任意一项所述高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法，其特征在于，步骤A中所述早期性别鉴定在F1代小鼠1周龄时进行；步骤B中所述早期性别鉴定在F2代小鼠1周龄时进行；步骤C中所述早期性别鉴定在F3代小鼠1周龄时进行。2CN109937965A说明书1/5页一种高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法技术领域[0001]本发明涉及一种高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法，属于实验动物繁育技术领域。背景技术[0002]小鼠是医药研究的重要模式生物，在生命科学研究领域中一直被广泛应用，特别是人源化小鼠模型是研究人类疾病的活体替代模型，在阐明发病机制，药物筛选等方面有巨大优势和广泛应用前景，而这些模型的建立需要体外获得高发育潜能胚胎工程为基础。“试管婴儿技术”是19世纪人类生殖医学的一个重大发明，而“试管婴儿技术”对环境、培养基等有严格的要求，为保证稳定的成功率及子代的健康，需要一个敏感性和可靠性高的检验体系。[0003]由于小鼠胚胎与人类胚胎有着几乎相同的发育经历，鼠胚试验成为检测人早期胚胎体外发育环境的最佳模式。大量科学试验发现大多数近交系和封闭群小鼠的受精卵体外培养经过第一次分裂后会出现发育停滞，不再继续发育成囊胚，这种现象称为2-细胞阻滞，2-细胞阻滞可导致体外胚胎基因的操作成功率大大降低，同时也是体外鼠胚试验的关键节点，影响试验的稳定性及结果的准确性。封闭群的ICR小鼠属于2-细胞阻滞系，发育至囊胚期胚胎大大降低，影响了对胚胎发育环境的判定。因此，急需要一种可以克服2-细胞阻滞的高囊胚形成率ICR小鼠，来建立一个稳定性和敏感性较高的胚胎检测体系；同时，