一种柠檬苦素的提取方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111499681A(43)申请公布日2020.08.07(21)申请号202010147937.7A61P11/00(2006.01)(22)申请日2020.03.05A23L33/105(2016.01)(71)申请人广州市莱檬生物科技有限公司地址510631广东省广州市天河区中山大道西140号1708房（不可作厂房使用）（仅限办公用途）申请人莱檬(清远市)生物科技有限公司广东纤友朵美生物科技有限公司(72)发明人廖劲松(74)专利代理机构广州圣理华知识产权代理有限公司44302代理人顿海舟董觉非(51)Int.Cl.C07J73/00(2006.01)A61P1/16(2006.01)权利要求书1页说明书7页(54)发明名称一种柠檬苦素的提取方法(57)摘要本发明公开了一种柠檬苦素的提取方法，包括以下几个步骤：预处理，将柠檬籽和柠檬皮渣加入水浸泡，加入预处理酶分解杂质；提取，将预处理产物加入提取酶进行酶解，同时加入酸进行酸解，固液分离，去除固体残渣，留下液体，得到初产物；去除果胶，将初产物真空浓缩，加酒精醇沉，分离絮状物沉淀，留下液体；提纯，先进行萃取，然后使用大孔树脂分离。本发明提取方法设计合理，各个步骤相互关联，逐一去除杂质，萃取和大孔树脂分离联合使用，并且先进行萃取然后再进行大孔树脂分离，结合了两种分离的有点，分离效率高，产品纯度高。CN111499681ACN111499681A权利要求书1/1页1.一种柠檬苦素的提取方法，其特征在于，包括以下几个步骤：(1)预处理；将柠檬籽和柠檬皮渣加入水浸泡，加入预处理酶分解杂质；(2)提取：将预处理的产物加入提取酶进行酶解，同时加入酸进行酸解，(3)固液分离：去除固体残渣，留下液体，得到初产物；(4)去除果胶：将初产物真空浓缩，然后醇沉，分离絮状物沉淀，留下液体；(5)提纯：萃取，将步骤(4)获得的溶液作为提取液加入萃取剂进行萃取，萃取完成后分离萃取液，合并萃取液使用旋转蒸发设备去除萃取剂，随后利用大孔树脂分离，即将旋转蒸发后的产物溶解并加入大孔树脂完全浸泡，过滤分离大孔树脂，之后水洗大孔树脂并使用洗脱剂解吸，收集解吸液并进行真空干燥，即可得到柠檬苦素成品。2.根据权利要求1所述的提取柠檬苦素的方法，其特征在于，所述步骤(5)中提取液与萃取剂的体积比1：(1-3)，萃取时间为15-40分钟，萃取1-3次，所述萃取剂为二氯甲烷溶液。3.根据权利要求1或2所述的提取柠檬苦素的方法，其特征在于，所述步骤(5)中所述洗脱剂为无水乙醇，所述大孔树脂为HPD100型大孔树脂、HPD600型大孔树脂、HPD722型大孔树脂、HPD750型大孔树脂中的一种。4.根据权利要求3所述的提取柠檬苦素的方法，其特征在于，所述步骤(3)中将得到的初产物静置7-14天。5.根据权利要求4所述的提取柠檬苦素的方法，其特征在于，所述步骤(1)中柠檬籽和柠檬皮渣与水的重量比为1:(9-20)，所述预处理酶包括淀粉酶、蛋白酶，所述蛋白酶为枯草杆菌蛋白酶,所述淀粉酶为1,4-α-D-葡聚糖水解酶。6.根据权利要求4所述的提取柠檬苦素的方法，其特征在于，所述步骤(2)中提取酶为诺维信Celluclast1.5L纤维素酶，加入量为总重量的0.1-1％，提取时间为0.5-2小时，所述酸为硝酸，酸解过程中反应体系的pH为2-4，提取时间为0.5-2小时。7.根据权利要求4所述的提取柠檬苦素的方法，其特征在于，所述步骤(3)中固液分离使用的设备为板框式过滤机。8.根据权利要求4所述的提取柠檬苦素的方法，其特征在于，所述步骤(4)中醇沉用乙醇和异丙醇的混合溶液进行处理，乙醇和异丙醇的体积比为(3-5):1，所述乙醇的浓度不小于96％，所述异丙醇的浓度不小于94％。9.根据权利要求1-8任一项所述的提取柠檬苦素的方法所提取的柠檬苦素的用途，所述用途包括用于制备功能性饮料和药物。10.根据权利要求9所述的柠檬苦素的用途，其特征在于，所述用途包括肺炎治疗和康复、肝脏治疗和康复的药物制备。2CN111499681A说明书1/7页一种柠檬苦素的提取方法技术领域[0001]本发明属于生物医疗技术领域，涉及一种植物天然药物成分的提取技术领域，具体涉及一种柠檬苦素的提取方法及其应用。背景技术[0002]柠檬苦素，又称为黄柏内酯、吴茱萸内酯，具有抗肿瘤、昆虫拒食、抗病毒、镇痛、抗炎、催眠等多种生物活性，是一种重要的天然药物原料，可用于治疗肺炎、功能性食品添加剂、抗癌食品、杀虫剂、饲料添加剂等。目前，提取分离柠檬苦素采用多次萃取、多次柱层析和制备液相的方法，这种提取方法较为繁琐，且提取率低。[0003]CN102442916A公开了一种向天果中柠檬苦素类化合物C的分