异种生物衍生骨与兔骨髓间充质干细胞的体外黏附实验研究.docx

异种生物衍生骨与兔骨髓间充质干细胞的体外黏附实验研究【摘要】目的：探寻良好的骨组织工程支架材料。方法：以市售新鲜猪股骨制备一种生物骨衍生材料将材料与兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合培养扫描电镜下对复合培养过程进行动态观察。结果：异种生物衍生骨具有三维立体多孔结构并有良好的生物相容性和材料细胞界面。结论：异种生物衍生骨是一种具有临床应用前景、适用于构建组织工程骨的支架材料。【关键词】骨支架材料；生物衍生骨；骨髓间充质干细胞ExperimentalStudyofRabbitBoneMesenchymalStemCellsWithXenogeneicBiologicalDerivativeCancellousBone/XIAOShi-huiWEIQing-junWEIJi-huaetal.//MedicalInnovationofChina20129(13)：003-005【Abstract】Objective：Toexploregoodbonetissueengineeredscaffold.Methods：Tomadebiologicalderivativebonematerialwithfreshpigfemoralthencoculturewithrabbitbonemesenchymalstemcellsthecellattachmentandgrowthweredetectedtoevaluatethecelluarcompatibilitytobiomaterial.Results：Xenogeneicbiologicalderivativecancellousbonehave3Dporousstructuremeanwhilehavegoodbiocompatibilityandmaterial-cellinterface.Conclusion：Therearebrightprospectsinclinicapplicationforthexenogeneicbiologicalderivativecancellousboneapplicabletotheconstructionofthebonetissueengineering.【Keywords】Bonescaffoldmaterial;Biologicalderivedbone;BonemesenchymalstemcellsFirst-author’saddress：TheFirstAffiliatedHospitalofGuangxiMedicalUniversityNanning530021Chinadoi:10.3969/j.issn.1674-4985.2012.14.002创伤、肿瘤术后等原因常常造成大段骨缺损、肢体功能丧失。为了满足修复治疗的需要众多研究者摸索了大量修复骨缺损的方法目前组织工程提供了一个新的途径运用组织工程的方法以支架材料为载体复合分离的种子细胞在体外预先构建有生命的种植体植入体内以修复组织缺损替代后重建器官结构维持改善组织器官功能。本实验从探寻良好的骨组织工程支架材料的目的出发拟制备一种生物骨衍生材料将此材料与兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外复合培养通过电镜对复合培养过程进行动态观察了解该材料与BMSCs的生物相容性及黏附情况寻找一种有临床应用前景适用于构建组织工程骨的支架材料。1材料与方法1.1实验动物纯种新西兰大白兔1只4周龄体重1.5kg购自广西医科大学实验动物中心。1.2主要仪器培养箱(HERACAN150i)超净工作台(苏净)倒置显微镜(OLympusCKX41)离心机(上海飞鸽)VEGA3TESCAN扫描电镜(捷克)低糖DMEM培养基(Hyclone)胎牛血清(杭州四季青公司)0.25%胰蛋白酶(吉诺)。1.3实验方法1.3.1生物衍生骨的制备取新鲜市售新鲜猪股骨剔除周围软组织、骨膜和关节软骨保留松质骨再将其制成1cm×0.4cm×0.3cm的骨条经脱蛋白、脱脂、脱钙后制成生物衍生骨-80℃深低温冰箱保存48h后经环氧乙烷消毒-4℃保存备用。取部分骨支架做扫描电镜观察支架形态[1]。1.3.2兔BMSCs的分离3%戊巴比妥钠按1ml/kg剂量经兔耳缘静脉行全身麻醉。常规消毒铺巾于双侧股