一种小鼠子宫内膜损伤模型的构建方法及构建得到的模型.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111839798A(43)申请公布日2020.10.30(21)申请号202010385233.3(22)申请日2020.05.09(71)申请人新乡医学院地址453000河南省新乡市红旗区新延路(72)发明人刘彦礼林俊堂张胜辉孙钰椋潘莹乔梁杨芬陈童彤郭睿(74)专利代理机构河南大象律师事务所41129代理人张继锋(51)Int.Cl.A61D7/00(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图5页(54)发明名称一种小鼠子宫内膜损伤模型的构建方法及构建得到的模型(57)摘要本发明属于动物实验模型构建技术领域，具体涉及一种小鼠子宫内膜损伤模型的构建方法及构建得到的模型。该子宫内膜损伤模型的构造方法是非创伤性的，包括下述步骤：对小鼠进行呼吸麻醉诱导，麻醉诱导成功后肌肉注射间苯三酚，使用小鼠灌胃针从小鼠阴道进入，探查宫颈松弛后进入子宫角，注射95％乙醇并停留特定时间，之后除去残留乙醇。小鼠子宫内膜损伤模型的构建方法不会通过剖腹的方式对小鼠子宫局部肌层造成损伤，造模效果稳定且成功率高。CN111839798ACN111839798A权利要求书1/1页1.一种小鼠子宫内膜损伤模型的构建方法，其特征在于，所述子宫内膜损伤模型的构造方法是微创的，包括下述步骤：对小鼠进行麻醉诱导，麻醉诱导成功后使用小鼠灌胃针从小鼠阴道进入，探查宫颈松弛后使所述小鼠灌胃针进入子宫角，注射95％乙醇并停留特定时间，之后除去残留乙醇。2.根据权利要求1所述的小鼠子宫内膜损伤模型的构建方法，其特征在于，所述小鼠灌胃针与连通三通管相连，所述连通三通管分别与95％乙醇和生理盐水相连。3.根据权利要求1所述的小鼠子宫内膜损伤模型的构建方法，其特征在于，所述小鼠灌胃针进入子宫角的深度为0.5-1.0cm。4.根据权利要求1-3中任意一项所述的小鼠子宫内膜损伤模型的构建方法，其特征在于，所述95％乙醇停留时间为10-60s。5.根据权利要求4所述的动物子宫内膜损伤模型的建造方法，其特征在于，所述95％乙醇停留时间为40s。6.根据权利要求1所述的小鼠子宫内膜损伤模型的构建方法，其特征在于，采用2-3％异氟烷对实验动物进行麻醉诱导并用1.5-2％浓度的异氟烷维持麻醉。7.根据权利要求1所述的小鼠子宫内膜损伤模型的构建方法，其特征在于，通过肌肉注射4％间三苯酚的方法使小鼠宫颈松弛。8.根据权利要求1所述的小鼠子宫内膜损伤模型的构建方法，其特征在于，通过使用生理盐水冲洗子宫角的方法稀释并除去残留的乙醇。9.一种小鼠子宫内膜损伤模型，其特征在于，所述小鼠子宫内膜损伤模型采用如权利要求1-8中任意一项所述的方法构建得到。2CN111839798A说明书1/5页一种小鼠子宫内膜损伤模型的构建方法及构建得到的模型技术领域[0001]本发明属于动物实验模型构建技术领域，具体涉及一种小鼠子宫内膜损伤模型的构建方法及构建得到的模型。背景技术[0002]薄型子宫内膜和宫腔粘连是子宫内膜损伤的常见病症，对女性健康造成极大威胁且会造成妊娠失败。妊娠早期的扩张刮除术是造成薄型子宫/宫颈粘连的常见原因。当前主要通过建立子宫内膜损伤模型的方法来对宫腔粘连/薄型子宫内膜进行研究。常见的用于构建子宫内膜损伤模型的动物主要有兔子、大鼠和小鼠。但由于小鼠手术操作难度较大，一般选用大鼠构建子宫内膜损伤模型。[0003]现有技术中的子宫内膜损伤大致可分为三种：子宫全层损伤模型、子宫缺血模型和子宫内膜化学损伤模型。[0004]子宫全层损伤模型的制备方法为：SD大鼠术前禁食1晚，10％戊巴比妥钠按5mL/kg腹腔注射麻醉后固定大鼠。剃去下腹部毛发，碘伏棉球消毒。在动物实验中心超净台中于耻骨联合上端2～3cm处挑起外层皮肤，剪刀纵向剪开腹壁皮肤2cm，逐层切开腹层黏膜、肌肉组织，进入腹腔，缓慢挑出大鼠的Y型子宫(双子宫、双宫颈、单阴道，两侧宫角互不相通)，于左侧子宫造模(IUA—L组)，眼科剪于子宫中段正中央纵向剪开子宫壁，尽量全部剪开(大鼠子宫全长3～4cm)，眼科剪沿着子宫内膜慢慢剪，彻底去除子宫内膜全层，手术过程中无菌纱布随时止血，保证视野清晰，深度控制在子宫组织浅肌层至深肌层，以确保子宫浆膜面的完整性。子宫内膜切除完成后，7-0显微无菌手术缝线间断缝合子宫，清除血液，右侧子宫作自身对照(IUA-R组)。Sham假手术组左侧子宫(Sham—L组)仅切开再缝合，右侧子宫(Sham—R组)不做处理。手术完成后，将子宫还纳至腹腔，清洗腹腔，4-0手术缝线关腹。7天和28天后分别处死各组大鼠，子宫取样，4％多聚甲醛固定组织，48h内石蜡包埋、切片。该造模方法可以使子宫全层损伤的子宫内膜薄弱，但仅手术区域的子宫内膜偏薄，与临床上人的子宫内膜整体偏