一种从三叶青茎叶中同时提取多糖和黄酮的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112007091A(43)申请公布日2020.12.01(21)申请号202010943459.0A61K135/00(2006.01)(22)申请日2020.09.09(71)申请人浙江武义汇美中药材有限公司地址321200浙江省金华市武义县壶山街道后舍村(72)发明人张进军张作法陆玫丹方立林吕国英(74)专利代理机构北京汇信合知识产权代理有限公司11335代理人昝美琪(51)Int.Cl.A61K36/87(2006.01)A61P39/06(2006.01)C08B37/00(2006.01)A61K127/00(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图1页(54)发明名称一种从三叶青茎叶中同时提取多糖和黄酮的方法(57)摘要本发明公开了一种从三叶青茎叶中同时提取多糖和黄酮的方法，包括：将三叶青茎叶烘干、粉碎得到三叶青茎叶干粉；将三叶青茎叶干粉与酸性乙醇溶液混合，得到混合液；将混合液进行水浴处理，离心得第一上清液和第一残渣；将第一残渣与去离子水混合均匀，进行微波提取，提取物离心得第二上清液和第二残渣；将第一上清液和第二上清液合并混合后旋蒸去除乙醇，加入NaCl至饱和，而后加入乙酸乙酯溶液进行萃取、分液；上层液经减压浓缩干燥后得到三叶青黄酮，下层液经透析、减压浓缩、沉淀后得到三叶青多糖。本发明简化了生产工艺，安全可靠，产率高，较好的保留了三叶青茎叶中多糖和黄酮的生物活性，具有较大的经济价值。CN112007091ACN112007091A权利要求书1/1页1.一种从三叶青茎叶中同时提取多糖和黄酮的方法，其特征在于，包括：将三叶青茎叶烘干、粉碎得到三叶青茎叶干粉；将所述三叶青茎叶干粉与酸性乙醇溶液混合，得到混合液；将所述混合液进行水浴处理，离心得第一上清液和第一残渣；将所述第一残渣与去离子水混合均匀，进行微波提取，提取物离心得第二上清液和第二残渣；将所述第一上清液和第二上清液合并混合后旋蒸去除乙醇，加入NaCl至饱和，而后加入乙酸乙酯溶液进行萃取、分液；上层液经减压浓缩干燥后得到三叶青黄酮，下层液经透析、减压浓缩、沉淀后得到三叶青多糖。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述三叶青茎叶的烘干温度为40～60℃，粉碎过60目筛。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酸性乙醇溶液为浓盐酸与乙醇的混合溶液，浓盐酸的量占乙醇体积比为10～15％。4.如权利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述三叶青茎叶干粉与酸性乙醇溶液的质量比为(1:5)～(1:15)。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述水浴处理的处理温度为70～80℃、处理时间为30～60min。6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一残渣与去离子水的质量比为(1:10)～(1:15)，所述微波提取的提取时间为5～10min、处理温度为100-200℃、微波功率为300-800W。7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述下层液经透析、减压浓缩、沉淀后得到三叶青多糖，包括：所述下层液调节pH＝7经透析、减压浓缩后，加入无水乙醇进行沉淀，收集沉淀得到三叶青多糖。8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述下层液利用10％碳酸钠调节pH＝7。9.如权利要求7所述的方法，其特征在于，进行透析的透析膜的截留量为3000Kb。10.如权利要求7所述的方法，其特征在于，用旋转蒸发仪减压浓缩后加入3倍体积的无水乙醇后进行醇沉，5000转/分下离心10min。2CN112007091A说明书1/6页一种从三叶青茎叶中同时提取多糖和黄酮的方法技术领域[0001]本发明涉及一种从农业副产物三叶青茎叶中提取活性物质的方法，具体涉及一种从三叶青茎叶中同时提取多糖和黄酮的方法。背景技术[0002]三叶青为葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤，是我国特有的珍稀药用植物。三叶青主要分布于我国浙江、福建、广西、云南等地，主要以地下块根入药，于2018年2月入选新“浙八味”中药材。主要用于各种癌症、热症、炎症等治疗，已列入浙江省公费报销中药名录。[0003]前期研究发现，三叶青具有抗肿瘤、抗炎镇痛、抗病毒、护肝、免疫调节等广泛的药理活性。相对于块根，三叶青茎叶极少得到合理利用，存在大量的资源浪费。近年来，研究者多集中于对三叶青块根组成成分和药效的研究，鲜有对三叶青茎叶的研究。[0004]经研究发现，三叶青茎叶比根中的黄酮含量高，抗氧化活性更强；现有专利中对三叶青茎叶的黄酮和多糖的提取展开了相关的研究，其通常采用乙醇溶液回流提取、超声提取等方法，但上述方法无法实现从三叶青茎叶中同时提取多糖和黄酮，造成了多糖或黄酮的浪费，提取率低；例如：[0005]专利文献CN104435401A公开了一种从三叶青茎叶中总黄酮的