通过电容型电位测量装置测量细胞内电位的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112041425A(43)申请公布日2020.12.04(21)申请号201980028400.4(74)专利代理机构北京信慧永光知识产权代理(22)申请日2019.04.26有限责任公司11290代理人洪俊梅张淑珍(30)优先权数据2018-0876892018.04.27JP(51)Int.Cl.C12M1/42(2006.01)(85)PCT国际申请进入国家阶段日C12M1/34(2006.01)2020.10.26C12Q1/06(2006.01)(86)PCT国际申请的申请数据G01N27/00(2006.01)PCT/JP2019/0181582019.04.26G01N27/28(2006.01)(87)PCT国际申请的公布数据G01N33/15(2006.01)WO2019/208828JA2019.10.31G01N33/483(2006.01)G01N33/50(2006.01)(71)申请人离子通道与转运研究公司地址日本埼玉县申请人斋藤光义(72)发明人斋藤光义权利要求书4页说明书29页序列表2页附图12页(54)发明名称检试剂对细胞的影响。通过电容型电位测量装置测量细胞内电位的方法(57)摘要本发明的目的在于提供通过对细胞的侵入性小且不需要熟练技术的简便方法来准确地测量和控制细胞内电位的方法。本发明通过预先导入有导电性纳米粒子的目标细胞的细胞表面上粘附的磁铁电极或者与导电性板电极接触的磁铁而来的磁力，将细胞内的导电性纳米粒子吸引到与上述电极的粘附面侧，贯通细胞膜而使细胞外的一端与磁铁电极或导电性板电极接触，或者使吸附在磁铁电极表面的导电性纳米粒子粘附在目标细胞的上方并被设置在细胞下方的铁板吸引而贯通细胞膜，由此留下与磁铁电极接触的细胞外的一端。与该导电性纳米粒子接触的导电性板与导电板(铝箔)一起形成电容器，或者在磁铁电极的上方隔着绝缘体设置磁性体而形成电容器，通过该电容器作为传感器感应目标细胞内的电荷变化，并转换为电压变化，从而能够测量CN112041425A细胞内电位。此外，可以观察向外液中给予的受CN112041425A权利要求书1/4页1.一种电容型电位测量装置，所述电容型电位测量装置为能够记录目标细胞的细胞内电位或电位变化的电容型电位测量装置，其特征在于，所述电容型电位测量装置包含与贯通目标细胞的细胞膜的导电性纳米粒子暴露于细胞外的一端在细胞外接触的导电性板，在设置成与所述导电性板的下面接触的导电板的下方设置有磁铁。2.如权利要求1所述的电容型电位测量装置，其特征在于，导电性板是在表面的至少一部分具有胶原涂布区域的导电性玻璃。3.如权利要求1或2所述的电容型电位测量装置，其特征在于，导电性板上面与电信号放大器的正极连接，与导电性板下面接触的导电板与电信号放大器的负电极连接，由导电性板上面和导电板形成电容型电位记录电路。4.一种电容型电位测量装置，所述电容型电位测量装置为能够记录目标细胞的细胞内电位或电位变化的电容型电位测量装置，其特征在于，所述电容型电位测量装置包含与贯通目标细胞的细胞膜的导电性纳米粒子暴露于细胞外的一端在细胞外接触的磁铁电极，所述磁铁电极除了与目标细胞接触的下面以外都被绝缘体覆盖并垂直固定，隔着绝缘体在上面还具有磁性体或磁铁吸引性金属板，在与所述细胞粘附的容器底面的下方设置有磁铁吸引性金属板。5.如权利要求4所述的电容型电位测量装置，其特征在于，覆盖所述磁铁电极与目标细胞接触的下面以外的绝缘体不与目标细胞所粘附的下方的基板表面接触，与磁铁电极的下面接触的目标细胞不与细胞外液隔离。6.如权利要求4或5所述的电容型电位测量装置，其中，贯通细胞膜的导电性纳米粒子是预先吸附在磁铁电极表面的导电性纳米粒子被所述磁铁电极从目标细胞上方压在细胞表面上，并被设置在细胞下方的金属板吸引而贯通细胞膜的导电性纳米粒子。7.如权利要求6所述的电容型电位测量装置，其特征在于，在预先吸附在磁铁电极表面时，使导电性纳米粒子在与转染试剂混合的状态下吸附在磁铁电极表面。8.如权利要求4～7中任一项所述的电容型电位测量装置，其特征在于，磁铁电极与电信号放大器的正极连接，在磁铁电极上面隔着绝缘体设置的磁性体或磁铁吸引性金属板与电信号放大器的负电极连接，由磁铁电极和磁性体或磁铁吸引性金属板形成电容型电位记录电路。9.一种用于测量目标细胞的细胞内电位或电位变化的方法，其特征在于，所述方法包括以下工序(1)～工序(3)：(1)向粘附在导电性板上的目标细胞内导入导电性纳米粒子的工序，其中，将导电板设置成与导电性板下面接触，所述导电板的下方设置有磁铁；(2)通过来自于导电性板下方的磁铁的磁力将目标细胞内的导电性纳米粒子吸引至细胞粘附面侧，使导电性