怀地黄的茎尖组织培养和快繁技术研究.docx

怀地黄的茎尖组织培养和快繁技术研究摘要研究怀地黄组织培养与快繁技术。以怀地黄茎尖部分为外植体在以MS作为基本培养基的基础上添加不同浓度的NAA、IAA、24-D、6-BA配制不同浓度的培养基对怀地黄的茎尖进行分化与诱导、继代与增殖及生根培养试验并对试管苗进行炼苗移栽。获得了怀地黄茎尖培养脱毒与诱导、增殖和生根的培养基以及生长所需要的外部条件和配套技术。关键词怀地黄；组织培养；快繁；培养基中图分类号S656.23+9文献标识码A文章编号1007-5739（2014）06-0104-01StudyonTissueCultureandRapidPropagationTechnologyofRehmanniaGlutinosaLiboschDINGFangHOUQian-qianLIUGuang-qingSUNXi-yunSUNFeng-ling（ShangqiuAcademyofAgricultureandForestryinHenanProvinceShangqiuHenan476000）AbstractThepaperaimedtostudythevirus-freetissuecultureandtherapidpropagationtechnology.WithRehmanniaglutinosaLiboschshoottipasexplantsMSwasusedasthebasicmediumwithdifferentconcentrationofNAAIAA24-Dand6-BAtoconfiguredifferentmediathetestsofdifferentiationandinductionsubcultureandproliferationaswellasrootingcultureonRehmanniaglutinosaLiboschwerecarriedoutandthetest-tubeplantletswerehardenedandtransplanted.Intheexperimentthemediaofdetoxificationandinductionproliferationandrootingwereobtainedaswellastheexternalenvironmentalconditionsfortheplantgrowthandthematchingtechnology.KeywordsRehmanniaglutinosaLibosch；tissueculture；rapidpropagation；culturemedium地黄为玄参科多年生草本植物具有抗衰老、抗肿瘤、降血糖等功效影响内分泌系统、心脑血管系统、中枢神经系统、造血系统等的活性有助于调节免疫功能。地黄在我国分布广泛可见于山西、河南、陕西、内蒙古、山东、安徽、河北、四川等地以河南的温县、孟县、博爱为地黄的道地产区。主要为大田栽培。怀庆地黄是指产于古怀庆府的地黄是著名的“四大怀药”之一[1]。针对目前地黄病毒病尚无安全有效药物进行治疗的现状通过植物茎尖脱毒技术利用植物营养体进行快速繁殖以保持原品种全部的遗传性实现该品种种质的一致性。1材料选择选择正在生长的怀地黄的茎尖。2培养条件地黄的组织培养与快速繁殖以MS为基本培养基在此基础上添加萘乙酸（NAA）、6-苄基腺嘌呤（6-BA）、二氯苯氧乙酸（24-D）、吲哚丁酸（IBA）、吲哚乙酸（IAA）。其中①诱导与分化培养基：MS+0.3mg/L6-BA+0.02mg/LNAA+0.1mg/LGA+30g/L蔗糖+5.5g/L琼脂；②继代与增殖培养基：MS+0.3mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+30g/L蔗糖+5.5g/L琼脂；③生根培养基：1/2MS+0.05mg/LIAA+30g/L蔗糖+5.5g/L琼脂。以上培养基的pH值为5.6～5.8均分装于培养瓶中封口后高压灭菌20min待用。培养条件：温度（26±2）℃湿度65%～70%光照强度为2000～2500lx光照时间12～14h/d。3无菌材料的获得和培养从正在生长的植株中选择无病虫、健壮、长势强、具有品种特征、长2～3