快速分离高效液相色谱法测定虎杖中的大黄素和大黄素甲醚.docx

快速分离高效液相色谱法测定虎杖中的大黄素和大黄素甲醚【摘要】目的：研究了快速分离高通量高效液相色谱法测定虎杖样品中的大黄素和大黄素甲醚。方法：虎杖样品提取液以AgilentzobaxC18(4.6mm×50mm×3.5?m)快速分离色谱柱为固定相乙腈-0.1%高氯酸为流动相进行梯度洗脱流速为1mL.min-1用紫外检测器检测检测波长为432nm。结果：大黄素和大黄素甲醚的标准回收率分别为94%~102%和93%~96%；RSD分别为0.6%~3.2%和1.1%~2.3%。结论：用该方法测定了虎杖中的大黄素和大黄素甲醚结果令人满意。【关键词】虎杖；大黄素；大黄素甲醚；高效液相色谱法【Abstract】Objective：Arapidhighperformanceliquidchromatographymethod（HPLC）forthedeterminationofemodinandphyscioninpolygonumcuspidatumwasstudied.Method：EmodinandphyscioncanbeseparatedonaAgilentzobaxEclipseXDB-C18(4.6mm×50mm×3.5μm).Themobilephaseconsistedofacetonitrile-0.1%HClO4ingradientmode.Theflowratewas1.0mLmin-1.Thewavelengthofthemeasurementwas432nm.EmodinandphyscioninpolygonumcuspidatumweremonitoredbySPDanddeterminedbythismethod.Result:Therecoveryofemodinandphyscionwasrespectively94%~102%and93%~96%Therelativestandarddeviationofemodinandphyscionwasrespectively0.6%~3.2%and1.1%~2.3%.Conclusion:ThemethodwasappliedtothedeterminationofemodinandphyscioninPolygonumcuspidatumwithgoodresult.【Keywords】Polygonumcuspidatum；Emodin；physcion；HPLC虎杖为蓼科植物（PolygonemcuspidutumSieb.etZucc）虎杖的干燥根茎和根春秋二季采挖味微苦、涩有利湿退黄、清热解毒、散瘀止痛、止咳化痰之功效主要用于湿热黄疸淋浊带下风湿痹痛痈肿疮毒水火烫伤闭经跌打损伤肺热咳嗽等症[1]。虎杖中含有大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等抗炎、抑菌、抗病毒及抗肿瘤的作用的蒽醌类化合物[3-6]也含有虎杖苷、白藜芦醇等具有抗氧化、抗肿瘤的非蒽醌类化合物。目前蒽醌类化合物的测定常用高效液相色谱法但通常会出现分离时间较长溶剂的消耗量较大分离度不太理想等缺点[7]。针对以上缺点本文通过采用AgilentZOBAXEclipseXDB-C18（4.6mm×50mm3.5μm）高通量快速分离色谱柱优化流动相优化检测波长等方法实现了虎杖中蒽醌类化合物的分离。此方法具有分离时间较短柱压较底流动相消耗较少等优点同时采用双指标法对虎杖进行质量控制具有一定的意义。1实验部分1.1仪器和试剂SPD-10Avp紫外检测器：SHIMADZU；LC-10ATvp二元泵：SHIMADZU；SK2200LH超声波清洗器：上海科导超声仪器有限公司；UV-4802双光束紫外可见分光光度计：尤尼柯上海仪器有限公司；AUW120D电子天平：SHIMADZU。大黄素：中国药品生物制品鉴定所（110756-200110）；大黄素甲醚：中国药品生物制品鉴定所（110756-200110）；乙腈：色谱纯；其他所用溶剂均为分析纯；水：二次蒸馏水；虎杖：购于怀化市医药公司。1.2储备液制备取大黄素和大黄素甲醚对照品放入五氧化二磷干燥器中干燥24h。精密称取大黄素0.00501g用10mL的甲醇溶解并定容至50mL即得0.1002mg.mL-1的大黄素储备液；精密称取大黄素甲醚0.00500g用约10mL乙醇溶解再用甲醇定容至50