大鼠下颌骨成骨细胞对格列本脲的转运.docx

大鼠下颌骨成骨细胞对格列本脲的转运[摘要]目的：研究下颌骨成骨细胞（MO）对格列本脲的跨膜转运为种植体全身给药提供实验依据。方法：将大鼠MO与含有格列本脲的磷酸盐缓冲液（PBS）共同孵育一定时间后收集细胞超声波破碎用高效液相色谱(HPLC)法测定裂解液中的药物含量用考马斯亮蓝法测定细胞蛋白总量。用细胞内药物含量与细胞蛋白的比值作为观察药物转运量的检测指标。结果：实验组MO内可测到格列本脲的存在。结论：MO可以跨膜转运格列本脲进入细胞内证实了人工种植牙给药的可行性。[关键词]成骨细胞；转运；高效液相色谱法；格列本脲；大鼠[中图分类号]R969[文献标识码]A[文章编号]1673-7210（2008）06（c）-035-02Biologicaltransportofglybenclamidebyosteoblastfromrat′smandibleWANGWei1LIUHong-chen2*ELing-ling2LIUYu2WUXia2(1.DepartmentofStomatologyPekingUnionMedicalCollegeHospitalBeijing100730China;2.InstituteforStomatologyChinaPLAGeneralHospitalBeijing100853China)[Abstract]Objective:Toinvestigatetransmembranetransportofglybenclamidebyosteoblastsverifyingthefeasibilityoflocaldrugdeliveryofthedesignofdentalimplantadministrationsystem.Methods:ToincubatetheratMOwithagentsolutionsthenafterincubationforindicatedtimestheagentsolutionswerequicklyremoved.Thecellswerecollectedandweredisruptedbyultrasonicwave.Thelysateagentconcentrationwasmeasuredbyhighperformanceliquidchromatography(HPLC)andthecelltotalproteinwasmeasuredbyBradfordassay.Results:GlybenclamidecouldbemeasuredinMO.Conclusion:Ratmandibularosteoblastcantransportglybenclamideintocellswhichprovesthepossibilityofthedentalimplantadministrationsystem.[Keywords]Osteoblast;Biologicaltransport;Highperformanceliquidchromatography(HPLC);Glybenclamide;Rat在糖尿病的药物治疗中选择合适的药物种类以及给药方式一直受到大家的广泛关注。为了减少全身用药的副作用局部给药越来越多刘洪臣[1]还提出了人工种植体给药系统的概念即通过特殊设计的种植体与骨的接触使药物进入牙周局部以及全身这需要了解口腔各组织、牙槽骨组织对不同药物的转运能力。本研究通过观察大鼠MO对格列本脲转运能力为种植体全身给药提供实验依据。1材料与方法1.1材料4~6周SD成年大鼠（军事医学科学院动物所提供）；格列本脲（SigmaUSA）；高效液相色谱仪（Agilent1100LC色谱系统紫外检测器）。1.2细胞培养将4~6周SD成年大鼠颈椎脱臼法处死置于75%酒精中浸泡5min在无菌条件下取出带有肌肉和筋膜的下颌骨置于75%酒精中洗5~10s后在5.25%NaClO中浸泡1min用PBS(含200U/ml青霉素、200μg/ml链霉素)冲洗3次完全剥离肌肉和筋膜拔除牙齿将下颌骨用咬骨钳剪碎成2mm×2mm的骨片后用PBS冲洗骨片去除残余血液加0.125%胰酶在37℃消化8min。