一种利用超滤和纳滤的技术制备高纯度NMN的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112851720A(43)申请公布日2021.05.28(21)申请号202011625878.6(22)申请日2020.12.30(71)申请人音芙医药科技（上海）有限公司地址201601上海市松江区泗泾镇望东中路1号12幢201室(72)发明人余建军徐钦源(51)Int.Cl.C07H1/06(2006.01)C07H19/048(2006.01)B01D61/58(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图2页(54)发明名称一种利用超滤和纳滤的技术制备高纯度NMN的方法(57)摘要本发明公开了一种利用超滤和纳滤的技术制备高纯度NMN的方法，该方法通过选用合适的超滤膜和纳滤膜能成功实现酶催化NMN和化学合成NMN的有效分离，高产率获得高纯度的NMN产品。对于酶催化制备的NMN，先过滤回收固定化酶催化剂。然后用超滤膜除去体系中的大分子化合物如ATP，ADP。用纳滤膜除去小分子的化合物如烟酰胺，核糖等；最后，经浓缩析晶制得高纯NMN。对于化学合成方法制备的NMN，反应淬灭中和后先用纳滤膜除去反应中的盐和烟酰胺，核糖，溶剂残留。然后用超滤膜除去大分子杂质，如双磷酸化杂质，三磷酸化杂质。最后经纳滤浓缩后析晶制得高纯度NMN。CN112851720ACN112851720A权利要求书1/1页1.一种利用超滤和纳滤的技术制备高纯度NMN的方法，其特征在于：具体步骤如下：S1：先对酶法和合成法的反应液做一定的预处理；S11:对于酶法的反应液需先通过过滤方法除去固定化酶催化剂；S12:对于合成法反应液需要先加水淬灭反应体系，并用有机溶剂萃取除去反应溶剂磷酸三乙酯，加入合适的碱液调节pH值至4左右；S2：采用适合孔径的超滤和纳滤膜对反应体系中的杂质进行精确分离。2.根据权利要求1所述的一种利用超滤和纳滤的技术制备高纯度NMN的方法，其特征在于：所述S2中所使用的纳滤膜的规格为200‑800道尔顿，所使用的超滤膜为1000‑5000道尔顿。3.根据权利要求1所述的一种利用超滤和纳滤的技术制备高纯度NMN的方法，其特征在于：所述S1中酶的反应液，需先用超滤膜除去三磷酸腺苷和二磷酸腺苷，再用纳滤膜除去各种盐和核糖，烟酰胺；合成法反应液，需要先用纳滤膜除去反应液中残留的溶剂和中和所产生的盐如氯化钠，磷酸二氢钠，以及烟酰胺，核糖和原料烟酰胺核苷。4.根据权利要求1所述的一种利用超滤和纳滤的技术制备高纯度NMN的方法，其特征在于：所述S2中对于进行超滤或者纳滤的样品水溶液固含量控制在5‑10%。5.根据权利要求1所述的一种利用超滤和纳滤的技术制备高纯度NMN的方法，其特征在于：所述S2中对于超滤膜所使用增压泵的压力不能超过0.8MPa。6.根据权利要求1所述的一种利用超滤和纳滤的技术制备高纯度NMN的方法，其特征在于：所述S2中对于纳滤膜所以使用增压泵的压力不能超过2.5Mpa。7.根据权利要求1所述的一种利用超滤和纳滤的技术制备高纯度NMN的方法，其特征在于：所述S2中对于超滤膜样品浓缩后的固含量超过20%后，需要加入适量的水稀释至5‑10%，才能重新开始超滤。8.根据权利要求1所述的一种利用超滤和纳滤的技术制备高纯度NMN的方法，其特征在于：所述所述S2中对于纳滤膜，样品固含量超过30%后需要稀释至5‑10%后再重新进行纳滤；对于所述超滤和纳滤的温度控制在15‑20℃为宜。2CN112851720A说明书1/4页一种利用超滤和纳滤的技术制备高纯度NMN的方法技术领域[0001]本发明涉及合成工程剂领域，具体为一种利用超滤和纳滤的技术制备高纯度NMN的方法。背景技术[0002]烟酰胺单核苷酸(Nicotinamidemononucleotide，简称NMN)是一种人体内重要的物质，同时在一些水果和蔬菜中也有发现。NMN有2种不规则存在形式，α和β；β异构体是NMN的活性形式，分子量为334.221g/mol。因烟酰胺属于维生素B3，因此NMN属于维生素B族衍生物范畴，其广泛参与人体多项生化反应，与免疫、代谢息息相关。在人体中NMN是NAD+最直接的前体，其功能是通过NAD+体现。NAD+又叫辅酶Ⅰ，全称烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，存在于每一个细胞中，参与了上千项反应。在多种细胞代谢反应中，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）分子都扮演着重要角色，是细胞保持活力的重要支撑。近年来随着关于NMN的各种功效研究的不断深入，市场对于NMN的追捧也是与日俱增。这同时也对高纯度NMN的制备提出了更加迫切的需求。[0003]目前，β‑烟酰胺单核苷酸的合成方法主要包括两种途径，即酶催化合成和有机化学合成。酶催化合成β‑烟酰胺单核苷酸时，以烟酰胺、三磷酸腺苷和D‑核糖作为底物，在核糖激酶(RK)和