一种双面支架及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113332497A(43)申请公布日2021.09.03(21)申请号202110485196.8(22)申请日2021.04.30(71)申请人国家纳米科学中心地址100190北京市海淀区中关村北一条11号申请人中科院遗传与发育生物学研究所(72)发明人胥伟华陈春英闫娜(74)专利代理机构北京品源专利代理有限公司11332代理人巩克栋(51)Int.Cl.A61L31/12(2006.01)A61L31/04(2006.01)A61L31/02(2006.01)A61L31/00(2006.01)权利要求书2页说明书11页附图13页(54)发明名称一种双面支架及其制备方法和应用(57)摘要本发明提出了一种双面支架及其制备方法和应用。所述双面支架包括：壳聚糖胶原复合纤维层和羟基磷灰石修饰的壳聚糖胶原复合纤维层。所述的支架材料具有双层结构，壳聚糖胶原复合纤维层为阻隔层，维持组织再生的空间；羟基磷灰石修饰的壳聚糖胶原复合纤维层为功能层，为组织再生提供活性物质；再联合干细胞粘附于功能层，为组织再生提供良好的微环境，从而达到较好的修复效果。此外，该材料具有良好的生物相容性，促进细胞增殖和分化的能力。该双面支架材料联合干细胞用于组织再生，有利于外源性干细胞在损伤部位的停留，并且为内源性干细胞和外源性干细胞提供了一个较好的组织再生微环境，对组织再生在临床上的应用具有指导意义。CN113332497ACN113332497A权利要求书1/2页1.一种双面支架，其特征在于，所述双面支架包括：壳聚糖胶原复合纤维层和羟基磷灰石修饰的壳聚糖胶原复合纤维层。2.根据权利要求1所述的双面支架，其特征在于，所述壳聚糖胶原复合纤维层是由含RGD的壳聚糖胶原纺丝液经静电纺丝制备得到；优选地，所述含RGD的壳聚糖胶原纺丝液按质量百分含量计包括：壳聚糖1‑3％、胶原1‑15％、聚氧化乙烯0.25‑0.75％，余量为溶剂；优选地，所述含RGD的壳聚糖胶原纺丝液中RGD的浓度为0.02‑1mg/mL；优选地，所述壳聚糖的分子量为104‑105Da；优选地，所述胶原为Ⅰ型胶原，优选为牛肌腱的Ⅰ型胶原；优选地，所述聚氧化乙烯的分子量为104‑105Da；优选地，所述溶剂为乙酸水溶液，优选为85‑95wt％的乙酸水溶液；优选地，所述羟基磷灰石修饰的壳聚糖胶原复合纤维层包括所述壳聚糖胶原复合纤维层和沉积在所述壳聚糖胶原复合纤维层间的羟基磷灰石；优选地，所述羟基磷灰石的质量占所述羟基磷灰石修饰的壳聚糖胶原复合纤维层总质量的5‑20％。3.根据权利要求1或2所述的双面支架，其特征在于，所述双面支架的纤维直径为0.5‑1.5μm；优选地，所述壳聚糖胶原复合纤维层的孔径为10μm以下；优选地，所述羟基磷灰石修饰的壳聚糖胶原复合纤维层的孔径为20‑30μm；优选地，所述双面支架还包括纤维蛋白原和凝血酶；优选地，所述双面支架中纤维蛋白原的含量为1‑20wt％；优选地，所述双面支架中凝血酶的含量为10‑30U/cm2。4.根据权利要求1‑3中任一项所述的双面支架的制备方法，其特征在于，所述双面支架的制备方法包括以下步骤：(1)通过静电纺丝制备得到壳聚糖胶原复合纤维层；(2)将壳聚糖胶原复合纤维层置于羟基磷灰石沉积液中浸泡，得到所述羟基磷灰石修饰的壳聚糖胶原复合纤维层；(3)将所述壳聚糖胶原复合纤维层和所述羟基磷灰石修饰的壳聚糖胶原复合纤维层进行粘合，得到所述双面支架。5.根据权利要求4所述的双面支架的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述壳聚糖胶原复合纤维层的具体制备方法为：将壳聚糖、胶原、聚氧化乙烯、RGD和溶剂混合得到纺丝液，再通过静电纺丝技术制备壳聚糖胶原复合纤维，洗涤，干燥，得到所述壳聚糖胶原复合纤维层；优选地，所述静电纺丝技术的参数为：使用20‑23号针头，0.1‑1cm/min的挤出速率，低压‑5～0kV，高压15‑25kV；优选地，所述浸泡结束后还需进行洗涤，先采用乙醇洗涤至少3次，再采用水洗涤至少3次；优选地，所述干燥为冷冻干燥，所述干燥的温度为‑90～‑70℃，所述干燥的时间为12‑24h。2CN113332497A权利要求书2/2页6.根据权利要求4或5所述的双面支架的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述羟基磷灰石沉积液的浓度为0.1‑10mg/mL；优选地，步骤(2)中，所述浸泡需摇床上震荡，所述震荡的频率为70‑90rpm，所述震荡的时间为20‑60min；优选地，步骤(2)中，所述浸泡结束后还需进行洗涤，所述洗涤采用体积浓度为40‑60％乙醇，所述洗涤次数至少为3次。7.根据权利要求4‑6中任一项所述的双面支架的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述粘合的具体步骤为：将所述壳