一种佩兰及其制剂的质量控制方法、香豆素含量的测定方法及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113759014A(43)申请公布日2021.12.07(21)申请号202010896957.4(22)申请日2020.08.31(71)申请人北京康仁堂药业有限公司地址101301北京市顺义区牛栏山镇牛汇街5号(72)发明人付静张志强高扬王冬月李蕊(74)专利代理机构北京三聚阳光知识产权代理有限公司11250代理人周卫赛(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/34(2006.01)G01N30/86(2006.01)权利要求书2页说明书22页附图5页(54)发明名称一种佩兰及其制剂的质量控制方法、香豆素含量的测定方法及其应用(57)摘要本发明涉及一种佩兰及其制剂的质量控制方法、香豆素含量的测定方法及其应用，该质量控制方法包括获得佩兰及其制剂的特征图谱，所述特征图谱中包括1号峰、2号峰、3号峰和4号峰4个共有特征峰，3号峰为香豆素峰，以3号峰为参照物峰，其余峰的相对保留时间在规定值的±10％之内，规定值为：1号峰的相对保留时间为0.38,2号峰的相对保留时间为0.79,4号峰的相对保留时间为1.32。色谱条件适用于佩兰标准汤剂及佩兰配方颗粒，所用洗脱梯度更针对大极性成分，所得图谱峰形及分离度均较好，可以对佩兰标准汤剂、佩兰配方颗粒及佩兰饮片、药材进行多成分定性分析以及特定成分香豆素的定量分析。CN113759014ACN113759014A权利要求书1/2页1.一种佩兰及其制剂的质量控制方法，其特征在于，包括获得佩兰及其制剂的特征图谱，所述特征图谱中包括1号峰、2号峰、3号峰和4号峰4个共有特征峰，3号峰为香豆素峰，以3号峰为参照物峰，其余峰的相对保留时间在规定值的±10％之内，规定值为：1号峰的相对保留时间为0.38,2号峰的相对保留时间为0.79,4号峰的相对保留时间为1.32。2.根据权利要求1所述的佩兰及其制剂的质量控制方法，其特征在于，包括以下步骤：制备供试品溶液：取佩兰样品制成供试品溶液；制备对照药材参照物溶液：取佩兰对照药材制成对照药材参照物溶液；制备对照品参照物溶液：以香豆素为对照品制成对照品参照物溶液；色谱条件：照高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以体积分数为0.08-0.12％的磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，检测波长为274-278nm，柱温为33-37℃，流速为0.38-0.42ml/min；梯度洗脱程序具体为：0-10min，流动相A：流动相B的体积比为5％：95％→10％：90％；10-18min，流动相A：流动相B的体积比为10％：90％→22％：78％；18-23min，流动相A：流动相B的体积比为22％：78％→100％：0；32-40min，流动相A：流动相B的体积比为100％：0→5％：95％；测定法：取对照药材参照物溶液、对照品参照物溶液和供试品溶液，分别注入超高效液相色谱仪，进行测定，得到对照特征图谱。3.根据权利要求1或2所述的佩兰及其制剂的质量控制方法，其特征在于，所述佩兰样品为佩兰标准汤剂冻干粉、佩兰配方颗粒、佩兰饮片或佩兰药材。4.根据权利要求1-3中任一项所述的佩兰及其制剂的质量控制方法，其特征在于，供试品溶液的具体制备过程为：精密称定佩兰样品0.1-1.0g，然后精密加入甲醇20ml，称定重量，超声或回流处理20-40min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀、滤过，取续滤液；对照药材参照物溶液的具体制备过程为：精密称定佩兰对照药材0.1-1.0g，加水15-45ml，煎煮20-50min,离心，取上清液减压旋干，然后精密加入甲醇，称定重量，超声或回流处理20-40min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀、滤过，取续滤液；对照品参照物溶液的具体制备过程为：精密称定香豆素对照品，加入甲醇，制成每1ml溶液中含10-70μg香豆素的对照品参照物溶液。5.根据权利要求4所述的佩兰及其制剂的质量控制方法，其特征在于，供试品溶液的具体制备过程为：精密称定佩兰样品0.2g，然后精密加入甲醇20ml，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀、滤过，取续滤液；对照药材参照物溶液的具体制备过程为：精密称定佩兰对照药材1.0g，加水30ml，煎煮35min,离心，取上清液减压旋干，然后精密加入甲醇20ml，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀、滤过，取续滤液；对照品参照物溶液的具体制备过程为：精密称定香豆素对照品，加入甲醇，制成每1ml溶液中含50μg香豆素的对照品参照物溶液。6.根据权利要求1-5中任一项所述的佩