选择截留装置和降低截留率的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113846017A(43)申请公布日2021.12.28(21)申请号202111195177.8C12M1/34(2006.01)(22)申请日2021.10.13C12M1/12(2006.01)C12M1/04(2006.01)(71)申请人无锡药明生物技术股份有限公司C12M1/02(2006.01)地址214092江苏省无锡市滨湖区马山梅梁路108号(72)发明人宿宇宁魏照辉于海洋田军王伟钧(74)专利代理机构上海专利商标事务所有限公司31100代理人陈扬扬(51)Int.Cl.C12M3/02(2006.01)C12M3/06(2006.01)C12M1/38(2006.01)C12M1/36(2006.01)权利要求书1页说明书8页附图4页(54)发明名称选择截留装置和降低截留率的方法(57)摘要本申请公开了选择截留装置和降低截留率的方法。其中选择截留装置的方法包括a.确定样品的颗粒直径，所述颗粒直径是通过微量池湿法测定的最小颗粒直径值；b.获得不同孔径的多个截留装置，所述多个截留装置包括具有最大孔径的第一截留装置和具有最小孔径的第二截留装置；和c.比较所述颗粒直径与所述最小孔径以选择截留装置，其中，如果所述颗粒直径大于所述最小孔径，则选择第二截留装置，并且如果所述颗粒直径小于或等于所述最小孔径，则选择第一截留装置。CN113846017ACN113846017A权利要求书1/1页1.一种选择截留装置的方法，所述方法包括：a.确定样品的颗粒直径，所述颗粒直径是通过微量池湿法测定的最小颗粒直径值；b.获得不同孔径的多个截留装置，所述多个截留装置包括具有最大孔径的第一截留装置和具有最小孔径的第二截留装置；和c.比较所述颗粒直径与所述最小孔径以选择截留装置，其中，如果所述颗粒直径大于所述最小孔径，则选择第二截留装置，并且如果所述颗粒直径小于或等于所述最小孔径，则选择第一截留装置。2.如权利要求1所述的方法，其中所述截留装置包括中空纤维柱或中空纤维膜。3.如权利要求1所述的方法，其中所述样品包括发酵液。4.如权利要求1所述的方法，其中所述不同孔径的范围是0.1μm至1μm。5.如权利要求4所述的方法，其中所述不同孔径的范围是0.22μm至0.65μm。6.如权利要求1所述的方法，其中所述最大孔径大于或等于0.45μm，并且所述最小孔径小于0.45μm。7.如权利要求6所述的方法，其中所述最大孔径大于或等于0.65μm，并且所述最小孔径小于或等于0.22μm。8.一种降低截留率的方法，其包括：a.确定样品的颗粒直径，所述颗粒直径是通过微量池湿法测定的最小颗粒直径值；和b.比较截留装置的孔径和所述颗粒直径，其中，如果所述截留装置的孔径大于所述颗粒直径，则降低所述样品中直径小于截留装置的孔径的颗粒的比例。9.如权利要求8所述的方法，其中所述截留装置包括中空纤维柱或中空纤维膜。10.如权利要求8所述的方法，其中所述样品是发酵液。2CN113846017A说明书1/8页选择截留装置和降低截留率的方法技术领域[0001]本发明一般涉及生物制药领域，具体地，涉及灌流细胞培养中截留装置的选择和使用方法。背景技术[0002]目前在生物制药产业，大规模悬浮细胞培养方式主要包括分批补料式培养(Fed‑batch)，灌流式培养(Perfusion)及浓缩分批补料式培养(ConcentratedFed‑batch)等。尽管补料分批培养是生物药生产中最广泛使用的细胞培养模式，但是灌流培养作为一种可行的替换模式受到越来越多的关注。因为快速增长的以蛋白质为基础的治疗市场推动了灌流培养模式的需求。灌流式培养的反应器必须具有细胞截流装置，常见的细胞截留装置是中空纤维柱，孔径常见是0.22微米，它能够使细胞截留在反应器内，并使得目标产物和代谢废物透出。在截留系统的帮助下，灌流工艺可以将细胞密度维持在70×106个细胞/mL，产品产量可达到10g/L以上，而传统的补料分批培养工艺，产品产量通常只有5g/L以下(Lim，J.，Sinclair，A.，Shevitz，J.和Carter，J.B.BioPharmIht.24，54‑60(2011)；和Yang，W.C.，Minkler，D.F.，Kshirsagar，R.，Ryll，T.和Huang，Y.‑M.J.Biotechnol.217，1‑11(2016))。[0003]过滤系统作为细胞截留装置，是影响灌流培养的性能和产品截留的重要部分。目前广泛使用的过滤装置主要有两种：切向流过滤(TFF)和交替式切向流过滤(ATF)。ATF系统是传统单向TFF系统的替代。该设置的主要部分仍与TFF相同，包括中空纤维单元。差别在于驱动过滤器错流