一种调节卵巢功能的生物制剂及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113599503A(43)申请公布日2021.11.05(21)申请号202110854104.9A61P15/08(2006.01)(22)申请日2021.07.28C07K14/59(2006.01)C07K14/575(2006.01)(71)申请人安徽中起生物科技有限公司C07K16/26(2006.01)地址230000安徽省合肥市包河区经济开C07K16/02(2006.01)发区兰州路88号B座678室C07K19/00(2006.01)(72)发明人符修乐卞传忠C07K1/107(2006.01)(74)专利代理机构合肥中谷知识产权代理事务C12N15/81(2006.01)所(普通合伙)34146C12N15/16(2006.01)代理人洪玲(51)Int.Cl.A61K38/24(2006.01)A61K38/22(2006.01)A61K39/395(2006.01)A61K47/60(2017.01)A61K47/64(2017.01)权利要求书1页说明书7页序列表2页附图3页(54)发明名称一种调节卵巢功能的生物制剂及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种调节卵巢功能的生物制剂及其制备方法和应用，生物制剂为由重组抗缪勒管激素、PEG化的重组抗缪勒管激素、重组卵泡刺激素、PEG化的重组卵泡刺激素、抗缪勒管激素卵黄抗体、卵泡刺激素卵黄抗体中单个或者多个成分组成的口服制剂。本发明中，TAT诱导肽可促进蛋白的肠道吸收，PEG化的重组抗缪勒管激素和卵泡刺激素可延长半衰期，使用这两种重组蛋白分别免疫动物可获得含有这两种蛋白抗体的制品，可直接食用也可制成冲剂及压片制品等。重组抗缪勒管激素和其卵黄抗体制品，重组卵泡刺激素和其卵黄抗体制品，组成了一种可调节卵巢功能的体系，可用于临床治疗卵巢功能障碍及日常保健，且本产品成本低廉便于临床及日常保健使用。CN113599503ACN113599503A权利要求书1/1页1.一种调节卵巢功能的生物制剂，其特征在于，所述生物制剂为由重组抗缪勒管激素、PEG化的重组抗缪勒管激素、重组卵泡刺激素、PEG化的重组卵泡刺激素、抗缪勒管激素卵黄抗体、卵泡刺激素卵黄抗体中单个或者多个成分组成的口服制剂；其中，所述重组抗缪勒管激素为由抗缪勒管激素的氨基酸序列的N端连接TAT转导序列组成；所述重组卵泡刺激素为由卵泡刺激素的氨基酸序列的N端连接TAT转导序列组成；所述抗缪勒管激素卵黄抗体为通过重组抗缪勒管激素免疫卵生动物后，再从卵生动物生产的蛋黄中提取获得；所述卵泡刺激素卵黄抗体为通过重组卵泡刺激素免疫卵生动物后，再从卵生动物生产的蛋黄中提取获得。2.根据权利要求1所述的一种调节卵巢功能的生物制剂，其特征在于，编码所述重组抗缪勒管激素的氨基酸序列的基因序列如SEQIDNO:1所示，编码所述重组卵泡刺激素的氨基酸序列的基因序列如SEQIDNO:2所示。3.根据权利要求1所述的一种调节卵巢功能的生物制剂，其特征在于，所述PEG化的重组抗缪勒管激素和PEG化的重组卵泡刺激素为采用分子量为5kD的甲氧基聚乙二醇琥珀酰‑亚胺丙酸酯mPEG‑SPA对所述重组抗缪勒管激素和重组卵泡刺激素进行修饰后制备获得。4.根据权利要求1所述的一种调节卵巢功能的生物制剂，其特征在于，所述卵生动物为鸡。5.一种如权利要求1‑4任一所述的生物制剂的制备方法，其特征在于，所述重组抗缪勒管激素或重组卵泡刺激素的制备方法，步骤包括：①取人抗缪勒管激素氨基酸序列或卵泡雌激素氨基酸序列，在N端连接TAT转导序列，反向翻译获得目的基因序列，将目的基因序列连接到pYES2/CT质粒中；②将质粒用PEG/LiCl法导入到Invscv1酿酒酵母中，获得AMH工程菌或FSH工程菌；③取AMH工程菌或FSH工程菌进行发酵培养和纯化，获得重组的目的蛋白AMH或FSH。6.根据权利要求5所述的一种生物制剂的制备方法，其特征在于，所述PEG化的重组抗缪勒管激素和PEG化的重组卵泡刺激素的制备方法，步骤包括：(1)将重组抗缪勒管激素或重组卵泡刺激素进行真空冷冻干燥，获得粉剂；(2)利用mPEG‑SPA在反应缓冲体系中进行PEG化处理，获得PEG化修饰的目的蛋白。7.根据权利要求5所述的一种生物制剂的制备方法，其特征在于，所述抗缪勒管激素卵黄抗体或卵泡刺激素卵黄抗体的制备方法，步骤包括：步骤一、利用重组抗缪勒管激素或重组卵泡刺激素对卵生动物进行免疫，至卵生动物血清抗体效价为32以上时开始收集鸡蛋；步骤二、将鸡蛋的蛋黄液处理成粉状制剂后保存。8.一种如权利要求1‑4任一所述的生物制剂在作为调节由抗缪勒管激素和卵泡刺激素分泌异常所导致的卵巢功能障碍药物中的应用。2CN113599