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消毒与灭菌微生物控制的意义灭菌〔sterilization〕杀灭所有的微生物包括细菌的芽孢;消毒〔disinfection〕杀灭病原微生物;防腐〔antiseptic〕抑制微生物的生长繁殖;化疗(Chemotherapy):化疗是指利用具有选择毒性的化学物质如磺胺、抗生素等对生物体内部被微生物感染的组织进行治疗以杀死组织内的病原微生物但对机体本身无毒害作用的治疗措施。无菌〔asepsis〕不含活菌无菌技术〔aseptictechnique〕在进行外科手术或别离转接及培养时防止其它微生物污染实验材料或实验材料污染环境的操作方法。消毒、灭菌的方法一般可分为:热力灭菌法辐射杀菌法物理学方法滤过除菌法超声波杀菌法枯燥和低温抑菌法等化学方法消毒防腐〔一〕热力灭菌法分类:干热灭菌法湿热灭菌法1干热灭菌法A燃烧:B烧灼:C干烤:D红外线灭菌:燃烧动物尸体废弃物。烧灼金属制品〔镊子接种环等〕。干烤灭菌〔1〕160℃/2h烤箱〔oven〕〔2〕适用于耐高温物品。〔3〕温度下降至90~100℃时方可开启箱门否那么干烤物品会骤冷破碎或可燃物燃烧。2.湿热灭菌法A巴氏消毒法:63℃/30min72℃/15-30s82℃/3sB煮沸消毒法:100℃30min难以杀灭芽胞C流通蒸气消毒法:100℃15-30min难以杀灭芽胞D间歇蒸汽灭菌法:100℃15-30min37℃过夜培养〔3次〕E高压蒸气灭菌法:〔1〕含糖培养基:113℃〔8Ib/in2〕20~30min〔2〕一般耐高温物品(如培养基):121.3℃103.46kPa〔15Ib/in2〕15~30min高压蒸汽灭菌湿热与干热灭菌效果的比较湿热比干热灭菌好的原因:1细菌蛋白质在有水的情况下易于凝固变性2湿热穿透力强3湿热蒸气有潜热存在水蒸气凝固成水释放潜热迅速提高被灭菌物体的温度湿热对一般营养体和孢子的杀灭条件:多数细菌和真菌的营养细胞:在60℃左右处理5-10分钟;酵母菌和霉菌的孢子:用80℃以上温度处理;细菌的芽胞:121℃处理15分钟以上;影响热力灭菌法的因素〔二〕光线与射线的消毒作用1日光与紫外线机理:细胞DNA吸收能量形成胸腺嘧啶二聚体干扰DNA复制和蛋白质合成。特点:穿透力弱只适用于物体外表和空气;产生对人有害的臭氧〔四〕超声波的消毒作用可裂解细菌尤其对G+更敏感主要用于粉碎细胞提取细胞组分或制备抗原等(五〕渗透压高渗引起细胞脱水产生质壁别离。常用盐腌糖渍来保存食品。二化学消毒灭菌法机制:1、使微生物蛋白质凝固变性发生沉淀.如酒精等.2、破坏菌体的酶系统影响菌体代谢.如过氧化氢等.3、降卑微生物外表张力增加细胞膜的通透性使细胞发生破裂或溶解.如来苏儿等酚类物质.消毒剂的主要种类、浓度及用途1酚类:作用:菌体蛋白凝固;损伤细胞膜;灭活酶类浓度:石炭酸为3%-5%、来苏儿为2%用途:地面、器具外表和皮肤的消毒2醇类:作用机制:使菌体蛋白变性与凝固;干扰细菌代谢浓度:乙醇70%-75%用途:用于皮肤的消毒和体温计等的浸泡5外表活性剂:损伤细胞膜;灭活氧化酶等酶的活性;蛋白质沉淀〔1〕0.05%-0.1%新洁尔灭:皮肤粘膜、手术器械〔2〕0.05%-0.1%杜灭芬:伤口冲洗金属器械、塑料、橡皮类6烷化剂:使菌体蛋白和核酸的烷基化〔1〕10%甲醛:物品外表、空气〔2〕2%戊二醛:精密仪器、内窥镜等缺点:有一定的毒性影响消毒剂灭菌的因素三、化学疗剂〔一〕抗代谢物有些化合物在结构上与生物体所必需的代谢物很相似以至可以和特定的酶结合从而阻碍了酶的功能干扰了代谢的正常进行这些物质称为抗代谢物(Antimetabolite)。二氢蝶啶+对氨基苯甲酸二氢叶酸四氢叶酸辅酶F磺胺药