【精编医学资料】大肠菌群检测(三)重点.pptx

实训目的实训仪器与设备实训步骤LST肉汤BGLB肉汤结果1：10产气产气阳性1：100产气产气阳性1：1000产气产气阳性2、BGLB液体接种将产气的LST肉汤培养基进行液体接种。在酒精灯上灼烧接种环从LST肉汤培养基中挑取一环菌液接种于BGLB肉汤培养基中36℃培养48小时后。观察产气情况。液体接种操作要点：1、操作前消毒2、接种环灼烧完全镍丝要烧红。3、棉塞夹于拿接种针手的无名指和小指之间4、翻开棉塞后试管口要在酒精灯旁防止杂菌进入。1、观察试管内的小倒管如果小倒管有气泡存在或者小导管上漂说明试管产气。2、首先点燃酒精灯在酒精灯旁进行操作。其次接种前充分灼烧接种针将镍丝烧红为止。接种时将试管放于酒精灯上方火焰外焰处棉塞加于无名指和小指之间。3、吸量管在使用前进行灼烧拿管要求远离实训服使用前检查是否包扎完好无玻璃外露。思考题：1、大肠菌群检测流程2、回忆初发酵试验步骤3、大肠菌群检测涉及到几种培养基？LST肉汤培养基的制备步骤、配方是什么？2、初发酵实验步骤1〕称取25g固体样品参加225mL无菌水中均质制备成1：10样品溶液。2〕用1只1mL无菌吸量管吸取1：10样品溶液用无菌方法各取1mL分别参加到3只LST肉汤培养基中。3〕吸取1mL1：10样品溶液参加到装有9mL无菌试管中摇匀制备成1：100样品溶液。4〕换1只吸量管各取1mL1：100溶液参加到3只LST肉汤培养基中。5〕吸取1mL1：100样品溶液参加到装有9mL无菌试管中摇匀制备成1：1000样品溶液。6〕换1只支吸量管各取1mL1：1000溶液参加到3只LST肉汤培养基中。7〕36度±1度48小时±2小时培养后观察3、2种培养基LST肉汤培养基和BGLB肉汤培养基。LST肉汤培养基：胰蛋白胨或胰酪胨20.0g氯化钠5.0g乳糖5.0g磷酸氢二钾〔K2HPO4〕2.75g磷酸二氢钾〔KH2PO4〕2.75g月桂基硫酸钠0.1g蒸馏水1000mLpH6.8±0.2将上述成分溶解于蒸馏水中调节pH。分装到有玻璃小倒管的试管中每管10mL。121℃高压灭菌15min。内容总结