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第十三章 PCR基因扩增仪器(polymerasechainreactionGeneAmplifier)内容提要第一节PCR基因扩增仪工作原理PCR技术是在试管中(体外)给DNA的合成提供一种合适条件--模板DNA、dNTP、寡核苷酸引物、DNA聚合酶、合适的缓冲体系,及让DNA变性、复性及延伸的温度和时间,使DNA能够体外复制。Mullis等因此项技术获得1993年诺贝尔奖。其过程1:加热变性过程2退火,引物与靶序列结合过程3:延伸30次循环后靶序列扩增的数量---(10亿)二、PCR核酸扩增仪工作原理与控温方式PCR仪温度控制,有:水浴锅控温压缩机控温半导体控温离心式空气加热控温第二节PCR扩增仪的分类与结构一、普通定性PCR扩增仪(二)实时荧光定量PCR扩增仪TaqMan实时荧光定量PCR原理1、金属板式实时定量PCR仪2、离心式实时定量PCR仪Rotor-Gene3000荧光定量PCR仪3、各孔独立控温的定量PCR仪第三节PCR扩增仪的性能指标、操作规程及常见故障的排除2、温度的均一性:3、升降温的速度:4、不同模式下的相同温度特性:5、热盖温度(二)荧光检测二、PCR扩增仪的操作程序三、PCR扩增仪常见故障及其排除第四节PCR扩增仪的应用