【精编医学资料】动物细胞工程制药的研究进展.docx

动物细胞工程制药的研究进展1161001413167刘星星摘要：动物细胞工程制药是动物细胞技术在生物制药工业方面的应用。本文介绍了动物细胞工程制药所涉及的主要技术及其进展包括动物细胞融合技术、转基因动物技术和细胞大规模培养技术等在此基础上探讨了动物细胞工程制药的发展趋势。关键词：动物细胞工程；生物制药；细胞融合；转基因动物；细胞培养目录一、引言3二、动物细胞工程简介3（一）生产用动物细胞31.原代细胞32.传代细胞系(continuouscelllinesCCL)43.工程细胞系44.转化细胞系4（二）动物细胞工程制药技术51.细胞融合52.转基因动物53.细胞核移植技术64.动物细胞大规模培养7三、发展前景8四、结论8参考文献………………………………………………………………………………9一、引言动物细胞工程制药是动物细胞技术在生物制药工业方面的应用。本文介绍了动物细胞工程制药所涉及的主要技术及其进展包括动物细胞融合技术、转基因动物技术和细胞大规模培养技术等在此基础上探讨了动物细胞工程制药的发展趋势。二、动物细胞工程简介所谓动物细胞工程是根据细胞生物学及工程学原理定向改变动物细胞内的遗传物质从而获得新型生物或特种细胞产品的一门技术。这一技术在生物制药的研究和应用中起关键作用目前全世界生物技术药物中使用动物细胞工程生产的已超过80%例如蛋白质、单克隆抗体、疫苗等。当前动物细胞工程制药所涉及的主要技术领域包括细胞融合技术、细胞核移植技术、转基因动物技术和细胞大规模培养技术等方面。本文就动物细胞工程制药所采用的细胞种类及相关技术等进行综述。（一）生产用动物细胞目前用于生物制药的动物细胞有4类即原代细胞、二倍体细胞系、融合的或重组的工程细胞系和转化细胞系。1.原代细胞原代细胞是直接取自动物组织器官经过粉碎消化而获得的细胞悬液。动物细胞生产生物药品的早期一般用原代培养的细胞来生产疫苗如鸡胚细胞、原代兔肾细胞、鼠肾细胞、淋巴细胞等Ender最先用原代培养的猴肾组织细胞来生产脊髓灰质炎灭活疫苗。原代细胞增殖能力有限需要大量动物才能增加产量费钱费力限制了它的应用。2.传代细胞系(continuouscelllinesCCL)原代细胞经过传代筛选克隆从多种细胞成分中挑选并纯化出某种具有一定特征的细胞株称为CCL。许多CCL建立于50年代用它们来生产疫苗不仅可以降低实验动物的量并且因为所用的细胞性质均一通过体外大规模培养技术生产的疫苗可以保证质量避免了动物个体差异产生的疫苗质量不稳定问题。但CCL在生物学特性上与肿瘤细胞有许多相似之处有时是从肿瘤细胞衍生而来由于缺乏有效的科学手段来排除其潜在的致瘤性因而数十年间未允许CCL用于生产。70年代以后大量研究工作证实了二倍体细胞的安全性WI-38是第一个生产脊髓灰质炎灭活疫苗的二倍体细胞系。二倍体细胞系一般从动物胚胎组织中获取有明显的贴壁和接触抑制特性有正常细胞的核型一般可传代培养50代且无致瘤性现在CCL已被广泛用于人用治疗性药物的生产但仍不是理想的生产细胞系。表1列出了一些常用的生产用动物细胞系。3.工程细胞系工程细胞系是指采用基因工程技术或细胞融合技术对宿主细胞的遗传物质进行修饰改造或重组获得具有稳定遗传的独特性状的细胞系。用于构建工程细胞的动物细胞有BHK-21、CHO-dhfr、Namalwa、Vero、SP2/0、Sf-9等细胞系[1-2]。SP2/0-Ag14工程细胞系是通过融合的方法从抗羊红细胞活性的BALB/c的小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞系P3X63Ag8融合杂交瘤SP2/NL-Ag亚克隆中分离获得可用于生产单克隆抗体[2]。目前用重组DNA技术改造的CHO细胞生产干扰素、白介素、EPO、单克隆抗体、诊断试剂以及其它各种蛋白质类药品已成为国际医药市场上的热销产品但这些产品的生产规模普遍较小(大多为5～50升的小型培养罐)[5]。4.转化细胞系通过某个转化过程形成的常由于染色体断裂变成异倍体失去正常细胞特点而获得无限增殖能力。转化细胞系具有长期培养倍增时间短对培养条件和生长因子等要求较低的特点适于大规模工业化生产。在生物制药中可通过改造宿主细胞特性如延长细胞周期．提高工程细胞原始表达水平等来提高药物的产量。李红艳等研究空间环境对CHO(dhfr)细胞生长特性的影响结果表明空间诱变致生长减慢的细胞株有利于提高目的蛋白的产量为筛选优化的生物工程制药细胞提供可能[3]。目前cHo(dhfr)作为重要的基因表达受体细胞已成功应用于表达促红细胞生成素(EPO)、重组乙