丙泊酚对肢体缺血再灌注继发肺损伤保护作用的实验研究.doc

丙泊酚对肢体缺血/再灌注继发肺损伤保护作用的实验研究
工作单位：山西医科大学第二临床医院麻醉科
邮编：030001作者姓名：马平田蔼萍
摘要
目的：本实验利用大鼠下肢缺血/再灌注继发远隔器官肺损伤模型，观察临床麻醉浓度的丙泊酚对大鼠下肢缺血/再灌注后肺组织脂质过氧化产物丙二醛（MDA）含量、抗氧化酶超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷光甘肽（GSH）含量，组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及细胞间黏附分子（ICAM-1）表达的影响，结合组织病理改变，进一步探讨丙泊酚对肢体缺血/再灌注后远隔器官肺损伤的保护作用及其机制，为丙泊酚在脏器保护方面的临床应用提供实验支持。
方法：健康雄性SD大鼠24只，体重250-300g。25％的乌拉坦腹腔注射（1.2g·kg-1ip.）麻醉，随机分为3组：(l)假手术组（sham组，n=8），只进行手术操作不做其他处理；(2)单纯肢体缺血/再灌注组（I/R组，n=8），双下肢缺血3小时，再灌注4小时；(3)丙泊酚干预组（I/R+P组，n=8）于开放前10分钟静脉注射丙泊酚（用0.9％盐水稀释至0.5%）5mg·kg-1，随后持续输注10mg·kg-1·h-1，sham组、I/R组输注等量生理盐水lml·kg-1，随后2ml·kg-1·h–1维持。实验结束，颈动脉放血处死大鼠，取肺组织测定丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷光甘肽（GSH）含量及肺含水量，观察组织形态学改变及组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、细胞间黏附分子（ICAM-l）的表达情况。
结果：
1、肺组织MDA含量变化（表1）：I/R组肺组织MDA的含量（1.35±0.468nmol/mgprot）较sham组（0.83±0.16nmol/mgprot）明显增高(P<0.01)；与I/R组比较，I/R+P组肺组织MDA的含量（0.856±0.275nmol/mgprot）也明显降低（P<0.01）;I/R+P组与sham组相比肺组织中的MDA含量无差异性(P>0.05)。
2、各组织SOD活性改变（表1）：sham组肺组织SOD活性为12.681±1.732NU/mgprot,I/R组为7.512±2.153NU/mgprot,与sham组相比明显降低（P<0.01）,I/R+P组肺组织SOD活性为9.926±2.568NU/mgprot，较I/R组有所增高（P<0.05）,但仍然低于sham组（P<0.05）。
3、谷光甘肽（GSH）含量变化（表1）：I/R组肺组织GSH的含量（21.63±4.23mg/mgprot）较sham组（30.25±5.21mg/mgprot）明显减少(P<0.01)；与I/R组比较，I/R+P组肺组织GSH的含量（27.35±6.12mg/mgprot）明显增加（P<0.01）;I/R+P组与sham组相比肺组织中的GSH含量无差异性(P>0.05)
4、肺含水量（%）改变：sham组肺含水量为（62.8±8.35）%,I/R组为（76.2±6.23）%,I/R+P组为（68.9±7.12）％。I/R组与sham组相比肺含水量明显增加（P<0.01）；而I/R+P组较I/R组有所降低（P<0.05）；I/R+P组与sham组比较，差异无显著性意义（P>0.05）。
4、组织病理变化：(1)肺组织光镜观察，I/R组肺间隔增厚，间质中有大量中性粒细胞浸润，局部肺泡出现不张、肺泡水肿。I/R+P组肺间质仅轻度增宽，少量中性粒细胞浸润无肺不张或肺出血。
5、组织中iNOS、ICAM-1的表达（表2、3）：免疫组化切片以平均光度、平均灰度、阳性面积、阳性单位为指标进行半定量分析。I/R组iNOS、ICAM-1表达阳性的细胞较sham组明显增加（P<0.01），I/R+P组肺组织iNOS、ICAM-1表达阳性的细胞较I/R组明显减少（P<0.05）。
结论：丙泊酚对大鼠下肢缺血/再灌注继发远隔器官肺损伤具有一定的保护作用，其机制可能与清除氧自由基，进而减轻氧自由基对机体的过氧化损伤及继发性炎症损伤有关。
关键词：丙泊酚，缺血/再灌注，氧自由基，细胞间黏附分子-1，一氧化氮合酶。

GROUPMDA(nmol/mgprot)SOD(NU/mgprot)GSH（mg/mgprot）sham0.830±0.1612.681±1.73230.25±5.21I/R1.35±0.468**7.512±2.153**21.63±4.23**I/R+P0.856±0.275*9.926±2.568*△27.35±6.12*表1：各组肺组织MDA、SOD、GSH含量变化（±s）

***P<0.01vsshamgroup,*P<0.05vsI/Rgroup,△P<0.05vsshamgroup

表2：各