第一部分蛋白质讲义教材.ppt

第一章蛋白质三、蛋白质的特征元素---氮
含氮量较恒定，一般在16%左右
蛋白质系数——6.25
蛋白质含量=样品含氮量6.25第二节蛋白质的基本结构单位----氨基酸中文：如丙氨酸；
英文：三字母符号（Ala）和单字母符号（A）二、必需氨基酸（8种）：
人体不能自我合成，必须从外界中摄取的氨基酸氨基酸

丙氨酸

缬氨酸

亮氨酸

异亮氨酸

苯丙氨酸

色氨酸

甲硫氨酸

脯氨酸NH2—CO—CH2—CH2—NH3—CH2—CH2—CH2—CH2—三、氨基酸的理化性质等电点定义：某一氨基酸的净电荷等于零时的溶液pH值为该氨基酸的等电点
不同的氨基酸有不同的等电点
等电点时的特点：溶解度下降
用途：可根据氨基酸的等电点来分离不同氨基酸，如味精生产时将pH值调到3.22，谷氨酸沉淀下来。pI计算法：pI=（pK左′+pK右′）/2
pK左′:pI处左侧pK′值，pK右′:pI处右侧pK′值。
如：甘氨酸的两性解离为：赖氨酸的两性解离为：吸收光谱

所有20种基本氨基酸在可见光区都无光吸收，在近紫外区三种芳香氨基酸具有紫外吸收，即：
苯丙氨酸—257nm
酪氨酸—275nm
色氨酸—280nm氨基酸表观解离常数和等电点用途：可用于氨基酸的定性和定量测定
脯氨酸是亚氨基酸，只有一步反应，反应产物为黄色。（2）Sanger反应
氨基酸与二硝基氟苯（DNFB）反应，生成二硝基苯代氨基酸（DNP—氨基酸）（3）Edman反应
异硫氰酸苯酯与氨基酸反应生成PTH—氨基酸样品1第三节肽由于有巯基，所以有氧化还原反应
GSH+GSHGS—SG+2H++2e-
谷胱甘肽是生物体内重要的氧化还原物质，对细胞起到了保护作用，另外，还是其他细胞保护剂的还原剂第四节蛋白质结构二面角—和两个构象角称为二面角要点：
单链
右旋
一圈3.6残基
上升0.54nm
形成5→1氢键且全部平行
R－基指向外侧－折叠：
要点：肽链伸展，形成链间氢键（成为片层），R-基处于片层上下反平行b－折叠－转角（回折）：肽链180°旋转，氢键连接；卵溶菌酶三、超二级结构：
概念：相邻二级结构单元相互作用形成的聚合体四、结构域乳酸脱氢酶结构域如：卵溶菌酶一条肽链，124个氨基酸残基，分子量为14600肌红蛋白是肌肉中运输氧的蛋白质，一条肽链，153个氨基酸残基，分子量为16700，含一个血红素辅基，氧分子就结合在它的铁上。整个分子有8个-螺旋，并且有-转角和无规则卷曲，但是无-折叠。三级结构特征：①高低不平③外亲内疏如：血红蛋白含有四个亚基，为22，每个亚基含一个血红素，每个血红素可结合一个氧分子。亚基含141个氨基酸残基，亚基含146个氨基酸残基。Hemoglobin空间结构四级结构的结构特点-----对称性四级结构的优越性：氢键、盐键、疏水作用力、二硫键、配位键、范德华引力一、一级结构与功能的关系：一级结构与功能有密切的关系
1.氨基酸对功能的重要性如果改变的氨基酸是蛋白质执行功能所必需的，则这种氨基酸的改变对功能的影响极大，如果改变的氨基酸对功能无贡献，则它们的改变基本不影响蛋白质的功能。
如RNA酶，如果将其N-端的三个氨基酸去掉，酶的功能基本不变，但是，如果将组12改变，则酶失去活性。镰刀状贫血病：就是由于血红蛋白-链上第六位的谷氨酸被缬氨酸代替，使得血红蛋白分子在氧分压低的情况下容易聚合，形成杆状多聚体，致使红细胞由正常的圆盘状成为镰刀状，血液流动受到阻碍。同源蛋白：不同生物中具有同一功能的蛋白质。它们的特点是其一级结构中，与功能直接相关的残基相同，而其它残基有差异，这些残基是可以改变的，这种变化往往与生物进化有关。例：Cytc与进化
生物残基改变数生物残基改变数生物残基改变数
黑猩猩0狗11狗鱼23
恒河猴1骡11蛾31
兔9马12小麦35
袋鼠10鸡、火鸡13面包霉43
鲸10响尾蛇14酵母44
牛、猪、羊10韧齿龟15一定的结构，一定的功能第六节蛋白质的理化性质
一、两性解离与等电点：点样处蛋白质分子量小的几万，大的可达几百万，其大小为1~100nm，已经达到胶体质点的范围，同时，蛋白质分子外表为亲水表面，所以，蛋白质属于亲水胶体，并且是稳定的胶体。
稳定因素：水化膜，同种电荷+透析：大分子化合物不能通过半透膜的性，可用于蛋白质脱盐三、变性因素：物理：热、高能射线，振动；化学：强酸、强碱、变性剂。
原因：空间结构破坏。
性质改变：溶解度下降，反应活性改变。
标志：生物活性丧失盐析：高浓度中性盐使蛋白质沉淀的现象
原因：破坏了稳定胶体的两个因素280nm，由于有苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸,可用于蛋白质含量的测定
六呈色反应：茚三酮反应
双缩脲反应：可用于蛋白质含量的测定（540nm）一、蛋白质分离纯化的依据